微生物培養(yǎng)基配制實(shí)驗(yàn)操作指南
瀏覽次數(shù):1189 發(fā)布日期:2024-5-14
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微生物培養(yǎng)基的配制是一項(xiàng)既需要嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)態(tài)度又需精細(xì)操作技巧的工作。在微生物學(xué)研究中,培養(yǎng)基作為微生物生長(zhǎng)繁殖的“土壤”,其配制的質(zhì)量直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗和微生物培養(yǎng)的效果。
操作步驟:
1、準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1NNaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
3、過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。
4、分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
5、滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。
微生物培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng):
1、根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。
2、注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。
3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。
5、如需要加熱的時(shí)候注意時(shí)間的把握。
綜上所述,微生物培養(yǎng)基的配制是一項(xiàng)復(fù)雜而精細(xì)的工作,需要科研人員具備扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度。通過(guò)科學(xué)配制和嚴(yán)格質(zhì)量控制,我們可以為微生物學(xué)研究提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基,為科學(xué)研究的進(jìn)步貢獻(xiàn)力量。