生姜是廣受歡迎的辣味調(diào)料，事實證明，它不僅能為食物增添活力和味道，它所含的 [6]-姜酚成分對中性粒細胞有出人意料的作用。在最近的一項研究中，科學(xué)家們將焦點集中在食物成分上，對非感官組織中感官活性 TRP（瞬時受體電位）通道進行了深入探討，并進一步研究了[6]-姜酚這一常見的 TRPV1 激動劑如何對原代人中性粒細胞的細胞免疫反應(yīng)產(chǎn)生影響1。

中性粒細胞和多面手 TRPV1 通道

在這項研究中，研究人員主要關(guān)注了 TRPV1 通道。過去，TRP 通道因其在感官和熱感知方面的作用而為人所知，但現(xiàn)在，它們在非感官組織中的角色也逐漸受到更多關(guān)注。TRPV1 是這一家族的成員，其功能已被證實超越了單純的感官功能。例如，其激動劑壬二酰胺在減脂和調(diào)節(jié)血清素水平上顯示了潛力2。然而，TRPV1 在人類中性粒細胞中的具體作用仍是未解之謎。
 

中性粒細胞在免疫系統(tǒng)中扮演者關(guān)鍵角色，其復(fù)雜性我們并不陌生。它們具備一系列防御機制，包括吞噬、脫顆粒和生成活性氧（ROS）等。盡管如此，它們與 TRPV1 的相互作用在很大程度上還是一個灰色地帶。以往的研究表明，食物或藥用植物中的某些成分3可能會影響中性粒細胞的功能，如 ROS 的產(chǎn)生，但目前尚未明確這些成分中涉及的具體活性化合物。
 

這項研究提出了一個假設(shè)，營養(yǎng)相關(guān)濃度的[6]-姜酚可改變?nèi)祟愔行粤＜毎�的基本功能。研究人員試圖揭示這種濃度是否會影響細胞免疫反應(yīng)，包括 ROS 的產(chǎn)生和趨化因子 CXCL8 的分泌。

TRPV1通道不僅僅扮演"客串"的角色

利用活細胞流式細胞術(shù)，研究人員不只是研究了中性粒細胞中TRPV1 通道的存在情況。中性粒細胞是我們免疫系統(tǒng)的重要組成部分，研究團隊利用流式細胞術(shù)評估了原代人中性粒細胞表面的 TRPV1 通道的表達情況。他們分離細胞，并用 CD15 對其進行標記，CD15 是一種表面蛋白，通常被用作中性粒細胞的細胞標記物。接下來，他們用抗TRPV1 第一個胞外環(huán)的抗體對這些標記細胞進行染色，觀察它們之間的相互作用。
 

抗人 TRPV1（胞外）-FITC 抗體（#ACC-334-F）專門針對 TRPV1 通道的胞外部分，直接與異硫氰酸熒光素（FITC）結(jié)合，是Alomone的獨家產(chǎn)品。
 

結(jié)果很有啟發(fā)性（圖 1）。用 TRPV1 特異性抗體對中性粒細胞進行染色時，F(xiàn)ITC 的熒光強度明顯高于對照組，這證明 TRPV1 確實出現(xiàn)在中性粒細胞表面，為了解這些細胞的行為提供了一條新途徑。
 

為了確保這并不是偶然，研究團隊對來自四個不同供體的中性粒細胞進行了進一步的實驗研究。所有細胞發(fā)出的熒光信號都是相似的，這進一步證實了TRPV1表面表達是人中性粒細胞的普遍特征，而非異�，F(xiàn)象。

中性粒細胞上的 TRPV1 表面表達

圖 1. 人中性粒細胞表面表達 TRPV1 通道。用 TRPV1 特異性抗體 B) 或相應(yīng)的同型對照 A) 對分離的人中性粒細胞進行流式細胞術(shù)染色，兩者均與 FITC 結(jié)合。同時對細胞進行 CD15 染色。圖中數(shù)字表示正向和側(cè)向散射值或染色的平均熒光強度。C) TRPV1 和同型對照染色的直方圖疊加。D) 四個供體的 TRPV1 染色直方圖疊加。圖和圖例來自 Andersen, G. 等人（2023 年）《分子營養(yǎng)與食品研究》，67（4），2200434。

生姜與中性粒細胞活性

一項針對Ca2+敏感的染料Fura-2的實驗研究了[6]-姜酚如何影響中性粒細胞中的Ca2+濃度。在與 50 nM [6]-姜酚培養(yǎng)2小時后，鈣濃度顯著增加。與通常用作對照的離子霉素相比，鈣濃度平均上升了 18.4%。
 

在此基礎(chǔ)上，研究團隊進一步對[6]-姜酚激活TRPV1是否會引發(fā)TRPV1基因表達的改變提出疑問。與前述類似，經(jīng)2 小時孵育后，TRPV1 轉(zhuǎn)錄物和蛋白質(zhì)的水平保持穩(wěn)定。此外，常見的細胞因子和趨化因子基因基本不受影響，只有 IL6 和 IL24 等少數(shù)基因例外。

濃度問題 

研究團隊觀察到，在與 50 nM 的[6]-姜酚培養(yǎng)2 小時后，中性粒細胞上的蛋白質(zhì)表達發(fā)生了明顯變化。這導(dǎo)致 FPR1、CD11b 和 CD66b 等表達增加，而它們是參與中性粒細胞活化和反應(yīng)的關(guān)鍵標志物。此外，當細胞受到 fMLF（一種強效的中性粒細胞激活劑）的刺激時，趨化因子 CXCL8 的分泌也會增加。有趣的是，這些效應(yīng)僅在fMLF的狹窄濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出特異性，這表明[6]-姜酚與中性粒細胞功能之間存在著微妙的關(guān)系。
 

一個有趣的現(xiàn)象是，經(jīng)過2小時[6]-姜酚孵育并不會直接增加 ROS 的產(chǎn)生。這表明[6]-姜酚并未觸發(fā)ROS的生成，而是提升了細胞對其他激活性刺激的響應(yīng)能力，這可能是細胞在必要時發(fā)揮更為強大作用的前期準備。關(guān)于這是否構(gòu)成一種“啟動”方式，還需要進一步的驗證。
 

這項研究提出了一個有趣的觀點，即濃度依賴效應(yīng)。較高濃度的 fMLF 會導(dǎo)致受體脫敏，從而抵消 [6]-姜酚的作用。這為一個觀點提供了支撐，那就是較高的TRPV1配體濃度可能會對中性粒細胞的功能產(chǎn)生抑制作用，而較低的TRPV1配體濃度（例如50 nM）可能會對中性粒細胞的功能產(chǎn)生增強效果。這引發(fā)了一個關(guān)于潛在治療應(yīng)用的最優(yōu)濃度范圍的問題。

未來展望

這項研究表明，生姜等具有感官特性的常見食物成分可以對免疫細胞的細胞活動產(chǎn)生可測量的影響。這種作用是通過 TRPV1 通道產(chǎn)生的，鑒于 TRP 通道在這些細胞中廣泛表達，研究結(jié)果強調(diào)有必要進一步評估日常濃度的食品成分如何影響生物活性。
 

盡管研究結(jié)果肯定了 TRPV1 在人類中性粒細胞中的功能性作用，但仍存在眾多待解決的問題。這項研究僅探討了特定濃度的[6]-姜酚對結(jié)果的作用，這為進一步研究不同濃度對結(jié)果的影響提供了可能性。此外，研究的焦點主要集中在短期的響應(yīng)上，對長期的影響進行深入探討是非常必要的。
 

然而，該研究也證實了[6]-姜酚作為一種中性粒細胞功能調(diào)節(jié)劑具有巨大的潛能，其濃度可以通過合理的飲食攝入來實現(xiàn)。這項研究通過探討日常食品成分如何影響細胞的免疫反應(yīng)，為將來的相關(guān)研究開辟了一個充滿希望的路徑。

相關(guān)文獻：
1、 Lee HM, Shin DM, Kim KK, Lee JS, Paik TH, Jo EK. Roles of reactive oxygen species in CXCL8 and CCL2 expression in response to the 30-kDa antigen of Mycobacterium tuberculosis. J Clin Immunol. 2009 Jan;29(1):46-56. doi: 10.1007/s10875-008-9222-3. Epub 2008 Aug 9. PMID: 18690522.
2、 Rohm B, Holik AK, Kretschy N, Somoza MM, Ley JP, Widder S, Krammer GE, Marko D, Somoza V. Nonivamide enhances miRNA let-7d expression and decreases adipogenesis PPARγ expression in 3T3-L1 cells. J Cell Biochem. 2015 Jun;116(6):1153-63. doi: 10.1002/jcb.25052. PMID: 25704235; PMCID: PMC4949678.
3、 Miyazaki Y, Kusano S, Doi H, Aki O. Effects on immune response of antidiabetic ingredients from white-skinned sweet potato (Ipomoea batatas L.). Nutrition. 2005 Mar;21(3):358-62. doi: 10.1016/j.nut.2004.11.001. PMID: 15797679.