現(xiàn)代微生物學常用微生物培養(yǎng)基的配制
瀏覽次數(shù):1830 發(fā)布日期:2024-4-12
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
1.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細菌用)
牛肉膏3g/L,蛋白胨5g/L,NaC1 10 g/L,瓊脂1.5~2.0 g/L,pH 7.0~7.2。121℃滅菌20 min。JSENB品牌微生物培養(yǎng)原料一站供應。
2.高氏(Gause)1號培養(yǎng)基(培養(yǎng)放線菌用)
可溶性淀粉20 g/L,KNO3 1 g/L,NaCl 0.5 g/L, K2HPO4 0.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L, FeSO4 0.01 g/L,瓊脂 20 g/L,pH 7.2~7.4。
配制時,先用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀,倒入煮沸的水中,在火上加熱,邊攪拌邊加入其他成分,溶化后,補足水分至1000 ml。121℃滅菌20 min。
3. 查氏(Czapek)培養(yǎng)基(培養(yǎng)霉菌用)
NaNO3 2 g/L, K2HPO4 1 g/L,KC1 0.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L,F(xiàn)eSO4 0.01 g/L,蔗糖30 g/L,瓊脂15~20 g/L,pH自然。121℃滅菌20 min。
4.馬丁氏(Martin)瓊脂培養(yǎng)基(分離真菌用)
葡萄糖10 g,蛋白胨5 g,K2HPO4 1 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,1/3000孟加拉紅(rose bengal,玫瑰紅水溶液)100 ml,瓊脂15~20 g,蒸餾水800 ml,pH自然。115℃滅菌 30 min。
臨用前加入過濾除菌的0.03%鏈霉素稀釋液100 ml,使鏈霉素的終濃度為30 μg/ml。
5.馬鈴薯培養(yǎng)基(簡稱 PDA)(培養(yǎng)真菌用)
馬鈴薯200 g/L,蔗糖(或葡萄糖)20 g/L,瓊脂15~20 g/L,pH自然。121℃滅菌30min(若為葡萄糖則在115℃滅菌30 min)。
馬鈴薯去皮,切成塊煮沸30 min,然后用紗布過濾,再加糖及瓊脂,熔化后補足水至1000 ml。
6.麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(培養(yǎng)真菌用)
1)取大麥或小麥若干,洗凈后浸泡6~12 h,置15℃陰暗處,上面蓋紗布一塊,每日早、中、晚各淋水一次,待其發(fā)芽,麥根伸長至麥粒的兩倍時,停止發(fā)芽,攤開曬干或烘干備用。
2)將干麥芽磨碎,1份麥芽加4份水,置65℃水浴中糖化3~4 h,可用碘滴定糖化程度。加水約20 ml調(diào)勻,至產(chǎn)生泡沫,然后倒在糖化液中攪拌煮沸。
3)煮沸后的糖化液用4~6層紗布過濾,濾液如混濁不清,可用蛋白澄清,即將一個雞蛋白加水約20 ml,調(diào)勻至生泡沫時為止,然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。
4)將濾液稀釋到5~6波美度,pH約6.4,加入2%瓊脂即成。121℃滅菌30 min。
7.無氮培養(yǎng)基(培養(yǎng)自生固氮菌、鉀細菌等)
甘露醇(或葡萄糖)10 g/L,K2HPO4 0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,NaC1 0.2 g/L,CaSO4·2H2O 0.2 g/L,CaCO₃ 5 g/L,pH 7.0~7.2。115℃滅菌30 min。
8.半固體肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基100 ml,瓊脂0.35~0.4 g,pH 7.6,121℃滅菌20min。
9.合成培養(yǎng)基
偏磷酸銨1 g/L,KCl 0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,豆芽汁10 ml,瓊脂20 g/L。 pH 7.0。
加12 ml 0.04%的溴鉀酚紫(pH 5.2~6.8,顏色由黃變紫,作指示劑)。121℃滅菌 20 min。
10.豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培養(yǎng)基
黃豆芽100 g/L,蔗糖(或葡萄糖)50 g/L,pH自然。
稱新鮮豆芽100 g放入燒杯中,加水1000 ml,煮沸約30 min,用紗布過濾。加水補足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50 g,煮沸熔化。121℃滅菌20 min或115℃滅菌30 min。
11.油脂培養(yǎng)基
蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,NaCl 5 g/L,香油或花生油10 g/L,1.6%中性紅水溶液1 ml,瓊脂15~20 g/L,pH 7.2。121℃滅菌 20 min。
配制時,調(diào)好pH后,再加入中性紅,分裝時,需不斷攪拌,使油滴均勻分布于培養(yǎng)基中。
12.淀粉培養(yǎng)基
蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,NaC1 5 g/L,可溶性淀粉2 g/L,瓊脂15~20 g/L。JSENB品牌微生物培養(yǎng)原料一站供應,溶解淀粉時可參照高氏1號培養(yǎng)基的配制方法。
13.明膠培養(yǎng)基
牛肉膏蛋白胨液100 ml,明膠12~18 g。
在水浴鍋中將上述成分熔化,不斷攪拌。溶化后調(diào)pH 7.2~7.4。121℃滅菌30 min。
14.蛋白胨水培養(yǎng)基(用于吲哚試驗)
蛋白胨10 g/L,NaCl 5 g/L,pH 7.6。121℃滅菌 20 min。
15.糖發(fā)酵培養(yǎng)基(用于細菌糖發(fā)酵試驗)
蛋白胨水培養(yǎng)基1000 ml,1.6%溴鉀酚紫乙醇溶液1~2 ml,pH 7.6。
另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10 ml。
1)將上述含指示劑的蛋白胨水培養(yǎng)基(pH 7.6)分裝于試管中,在每管內(nèi)放一倒置的小玻璃管,使其充滿培養(yǎng)液。
2)將已分裝好的蛋白胨水和20%的各種糖溶液分別滅菌,蛋白胨水于121℃滅菌20 min,糖溶液則于115℃滅菌30 min。
3)滅菌后,以無菌操作將濃度為20%的無菌糖溶液加入蛋白胨水中(按每10 ml培養(yǎng)基中加入20%的糖液0.5 ml,使其終濃度為1%)。
16.葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(用于V-P反應和甲基紅試驗)
蛋白胨5 g/L,葡萄糖5 g/L,磷酸氫二鉀2 g/L,pH 7.0~7.2。115℃滅菌30 min。
17.麥氏(Meclary)瓊脂(培養(yǎng)酵母菌)
葡萄糖1 g/L,KCl 1.8 g/L,酵母浸膏2.5 g/L,NaAc 8.2 g/L,瓊脂15~20 g/L。115℃滅菌 20 min。
18.檸檬酸鹽培養(yǎng)基
NH4H2PO4 1 g/L, K₂HPO4 1 g/L, NaCl 5 g/L,MgSO4 0.2 g/L,檸檬酸鈉2 g/L,瓊脂15~20 g/L,1%溴麝香草酚藍乙醇液10 ml。
配制方法:上述各成分加熱溶解后,調(diào)pH至6.8,然后加入指示劑,搖勻后脫脂棉過濾。制成后為黃綠色,不要過堿,分裝試管,121℃滅菌20 min。
19.乙酸鉛培養(yǎng)基(用于硫化氫試驗)
pH 7.4的牛肉膏蛋白胨瓊脂100 ml,硫代硫酸鈉0.25 g,10%乙酸鉛水溶液1 ml。
配制方法:將牛肉膏蛋白胨瓊脂100 ml加熱熔解,冷卻至60℃時加入硫代硫酸鈉0.25 g,調(diào)至pH 7.2,分裝于三角瓶中,115℃滅菌15 min。取出后待冷卻至55-60℃,加入10%無菌乙酸鉛水溶液1 ml,混勻后倒入滅菌試管或平板中。
20.血瓊脂培養(yǎng)基
pH 7.6的牛肉膏蛋白胨瓊脂100 ml,脫纖維羊血(或兔血)10 ml。
配制方法:將牛肉膏蛋白胨瓊脂加熱熔化,待冷卻至50℃時,加入無菌脫纖維羊血(或兔血)搖勻后倒平板或制成斜面。37℃過夜檢查無菌生長即可使用。
21.玉米粉蔗糖培養(yǎng)基
玉米粉60 g/L,K₂HPO4 3 g/L,維生素B1 0.1 g/L,蔗糖10 g/L,MgSO4·7H2O 1.5 g/L。121℃滅菌30 min。
維生素B1溶液過濾除菌后再加入滅菌后的培養(yǎng)基中。
22.酵母膏麥芽汁瓊脂
麥芽粉3 g/L,酵母浸膏0.1 g/L。121℃滅菌30 min。
23.復紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基(遠藤氏培養(yǎng)基)(用于水體中大腸菌群測定)
蛋白胨10 g/L,乳糖10 g/L,K2HPO4 3.5 g/L,瓊脂20~30 g/L,5%堿性復紅乙醇溶液20 ml。
配制方法:先將瓊脂加入900 ml蒸餾水中,加熱熔解,再加入K₂HPO4及蛋白胨,充分溶解后,補足蒸餾水至1000 ml,調(diào)pH至7.2~7.4。加入乳糖,混勻溶解后,115℃滅菌20 min。稱取Na2SO3置一無菌空試管中,加入無菌水少許使之溶解,再在水浴中煮沸10 min后,立刻滴加于20 ml 5%堿性復紅乙醇常液中,直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此Na2SO3與堿性復紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持熔化狀態(tài)的培養(yǎng)基中,充分混勻,倒平板,放冰箱中備用,儲存時間不宜超過2周。
24.伊紅美藍培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)(用于水體中大腸菌群測定和細菌轉(zhuǎn)導)
蛋白胨水培養(yǎng)基100 ml,20%乳糖溶液2 ml,2%伊紅水溶液2 m,0.5%美藍水溶液1 ml。
配制方法:蛋白胨水培養(yǎng)基(pH 7.6)滅菌并冷卻至50℃左右,分別加入上述量的已滅菌的乳糖溶液,伊紅水溶液及美藍水溶液,搖勻后倒平板。乳糖于115℃滅菌20 min 即可。
在細菌轉(zhuǎn)導實驗中用半乳糖代替乳糖,其余成分不變。
25.乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(用于多管發(fā)酵法檢測水體中大腸菌群)
蛋白胨10 g/L,牛肉膏3 g/L,乳糖5 g/L,NaC1 5 g/L,1.6%溴甲酚紫乙醇客液1 ml/L,pH 7.2~7.4。
配制方法:將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000 ml蒸餾水中,調(diào)pH,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 ml,充分混勻后分裝于有倒置小管的試管中。115℃滅菌 20 min。
26.石蕊牛奶培養(yǎng)基
奶粉100 g/L,石蕊0.075,pH 6.8。121℃滅菌15 min。
27.基本培養(yǎng)基
K₂HPO4 10.5 g/L,KH2PO4 4.5 g/L,(NH4)2SO4 1 g/L,二水合檸檬酸鈉0.5 g/L,121℃滅菌20 min。
滅菌后加入:糖(20%)10 ml,維生素B1(硫胺素)(1%) 0.5 ml,MgSO4·7H2O(20%)1 ml,鏈霉素(50 mg/ml)4 ml(終濃度200 μg/ml),氨基酸(10 mg/ml)4 ml(終濃度40 μg/ml),pH自然。
28.庖肉培養(yǎng)基
配制方法:
1)取已去肌膜、脂肪的牛肉500 g,切成小方塊,置于1000 ml蒸餾水中,以弱火煮1 h,紗布過濾,擠出肉汁備用。肉渣用絞肉機絞碎,或用刀切成細粒。
2)肉汁加蒸餾水至2000 ml,加入蛋白胨20 g,葡萄糖2 g,NaCl 5 g及絞碎肉渣,置燒瓶搖勻后加熱使蛋白胨溶化。
3)取上清液測量pH,并調(diào)至8.0,121℃滅菌15 min,之后補足蒸發(fā)的水分,重新調(diào)整pH至8.0,再煮沸10~20 min,補足水量后調(diào)整pH為7.4。
4)將燒瓶內(nèi)容物搖勻,溶液和肉渣分裝于試管中,肉渣占培養(yǎng)基的1/4左右,經(jīng)121℃滅菌 15 min后備用。如當日不用,應以無菌操作加入已滅菌的石蠟凡士林以隔絕氧氣。
29.乳糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
乳糖5 g/L,牛肉膏5 g/L,酵母膏5 g/L,蛋白胨10 g/L,葡萄糖10 g/L,NaC1 5 g/L,瓊脂粉15 g/L,pH 6.8。
30.馬鈴薯牛乳培養(yǎng)基
配制方法:200 g馬鈴薯(去皮切塊)煮出汁,脫脂鮮乳100 ml,酵母膏5 g,瓊脂粉15 g,加水1000 ml,調(diào)節(jié)pH至7.0。制平板培養(yǎng)基時,牛乳與其他成分分開滅菌,倒平板前再混合。
31.尿素瓊脂培養(yǎng)基
尿素20 g/L,NaCl 5 g/L,K₂HPO4 2 g/L,蛋白胨1 g/L,酚紅0.012 g/L,瓊脂15 g/L,pH 6.8~7.0。JSENB微生物培養(yǎng)原料一站供應。
配制方法:在100 ml蒸餾水或去離子水中,加入除瓊脂外的上述所有成分,混合均勻后過濾除菌。將瓊脂加入900 ml蒸餾水中加熱煮沸,121℃滅菌15 min。冷卻至50℃混勻,分裝于滅菌的試管或平皿中。
32.RCM 培養(yǎng)基(強化梭菌培養(yǎng)基)(用于厭氧菌培養(yǎng))
酵母膏3 g/L,牛肉膏10 g/L,蛋白胨10 g/L,可溶性淀粉l g/L,葡萄糖5 g/L,半胱氨酸鹽酸鹽0.5 g/L,NaCl 3 g/L,NaAc 3 g/L,刃天青3 mg/L,pH 8.5。121℃濕熱滅菌30 min。
33.TYA 培養(yǎng)基(用于厭氧菌培養(yǎng))
葡萄糖40 g/L,牛肉膏2 g/L,酵母膏2 g/L,胰蛋白胨6 g/L,NH4Ac 3 g/L,KH2PO4 0.5 g/L, MgSO4·7H2O 0.2 g/L,F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01 g/L,水1000 ml, pH 6.5,121℃濕熱滅菌30 min。
34.玉米醪培養(yǎng)基(用于厭氧菌培養(yǎng))
玉米粉65 g,自來水1000 ml,混勻,煮10 min成糊狀,pH自然,121℃滅菌30 min。
35.中性紅培養(yǎng)基(用于厭氧菌培養(yǎng))
葡萄糖40 g/L,胰蛋白胨6 g/L,酵母膏2 g/L,牛肉膏2 g/L,NH4Ac 3 g/L,KH2PO4 5 g/L,中性紅0.2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,F(xiàn)eSO4·7HO 0.01 g/L,水1000 ml,pH 6.2,121℃濕熱滅菌30 min。
36.CaCO3明膠麥芽汁培養(yǎng)基(用于厭氧菌培養(yǎng))
麥芽汁(6波美度)1000 ml,水1000 ml,CaCO3 10 g,明膠10 g,pH 6.8,121℃滅菌30 min。
37.BCG牛乳培養(yǎng)基(用于乳酸發(fā)酵)
A溶液:脫脂乳粉100 g,水500 ml,加入1.6%溴甲酚綠(B.C.G)乙醇溶液1 ml,80℃滅菌20 min。
B溶液:酵母膏10 g,水500 ml,瓊脂20 g,pH 6.8,121℃滅菌20 min。
以無菌操作趁熱將A、B溶液混合均勻后倒平板。
38.乳酸菌培養(yǎng)基(用于乳酸發(fā)酵)
牛肉膏5 g/L,酵母膏5 g/L,蛋白胨10 g/L,葡萄糖10 g/L,乳糖5 g/L,NaCl 5 g/L,pH6.8。121℃濕熱滅菌20 min。
39.乙醇發(fā)酵培養(yǎng)基(用于乙醇發(fā)酵)
蔗糖100 g/L,MgSO4·7H2O 5 g/L, NH4NO3 5 g/L,20%豆芽汁20 ml。KH2PO4 5 g/L,pH自然。
40.柯索夫培養(yǎng)基(用于鉤端螺旋體培養(yǎng))
優(yōu)質(zhì)蛋白胨0.4 g,NaCl 0.7 g,KCl 0.02 g,NaHCO3 0.01 g, CaCl2 0.02 g, KH2PO4 0.09 g,NaH2PO4 0.48 g,蒸餾水500 ml,無菌兔血清40 ml.
配制方法:除兔血清外的其余各成分混合,加熱溶解,調(diào)pH至7.2,121濕熱滅菌20 min,冷卻后加入無菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分裝試管(5~10 ml/管),56℃水浴滅活1 h后備用。
41.加倍肉湯培養(yǎng)基(用于細菌轉(zhuǎn)導)
牛肉膏6 g/L,蛋白胨20 g/L,NaCl 10 g/L,pH 7.4~7.6。
42.半固體素瓊脂(用于細菌轉(zhuǎn)導)
瓊脂1 g,水100 ml,121℃濕熱滅菌30 min。
43.豆餅斜面培養(yǎng)基(用于產(chǎn)蛋白酶霉菌菌株篩選)
豆餅100 g加水5~6 倍,煮出濾汁100 ml,汁內(nèi)加入KH2PO4 0.1 g,MgSO4 0.05 g,(NH4)2SO4 0.05g,可溶性淀粉2 g,瓊脂2~2.5 g,pH 6.0。
44.酪素培養(yǎng)基(用于蛋白酶菌株篩選)
配制方法:
A液:稱取Na2HPO4·7H2O 1.07 g,干酪素4 g,加適量蒸餾水,并加熱溶解。
B液:稱取KH2PO4 0.36g,加水溶解。
酪素水解液:1 g酪蛋白溶于堿性緩沖液中,加入1%的枯草芽孢桿菌蛋白酶25 ml加水至100 ml,30℃水解1h。用于配制培養(yǎng)基時,其用量為1000 ml培養(yǎng)基中加入100 ml以上水解液。
A、B液混合后,加入酪素水解液0.3 ml,加瓊脂20 g,最后用蒸餾水容至1000 ml。
45.細菌基本培養(yǎng)基(用于篩選營養(yǎng)缺陷型)
Na2HPO4·7H2O 1 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,葡萄糖5 g/L,NaCl 5 g/L,K2HPO4 1 g/L,pH 7.0。115℃濕熱滅菌30 min。
46.YEPD 培養(yǎng)基(用于酵母原生質(zhì)體融合)
酵母粉10 g/L,蛋白胨20 g/L,葡萄糖20 g/L,pH 6.0。115℃濕熱滅菌20 min。
47.YEPD 高滲培養(yǎng)基(用于酵母原生質(zhì)體融合)
用0.6 mol/L的NaCl配制YEPD培養(yǎng)基,3%瓊脂。
48.YNB基本培養(yǎng)基(用于酵母原生質(zhì)體融合)
葡萄糖10 g/L,(NH4)2SO4 1 g/L,K₂HPO4 0.125 g/L,KHPO4 0.875 g/L,KI 0.0001 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,CaCl2·2H2O 0.1 g/L,NaC1 0.1 g/L,微量元素母液1 ml,維生素母液1 ml(母液均按常規(guī)配制),pH 5.8~6.0。
49.YNB高滲基本培養(yǎng)基(用于原生質(zhì)體融合)
用0.6 mol/L NaCl配制YNB基本培養(yǎng)基。
50.酚紅半固體柱狀培養(yǎng)基(用于檢查氧與菌生長的關系)
蛋白胨1 g/L,葡萄糖10 g/L,玉米漿10 g/L,瓊脂7 g/L,pH 7.2。
調(diào)好pH后,加入1.6%酚紅溶液數(shù)滴至培養(yǎng)基為深紅色,再分裝于大試管中,期裝量約為試管高度的1/2,115℃滅菌20min。細菌在此培養(yǎng)基中利用葡萄糖生長產(chǎn)酸,使酚紅從紅色變成黃色,在不同部位生長的細菌,可使培養(yǎng)基的相應部位顏色改變。注意培養(yǎng)時間不要太長,否則酸擴散以至于不能正確判斷結(jié)果。通過改變瓊脂用量配制為固體或半固體培養(yǎng)基。
51.LB 培養(yǎng)基
胰蛋白胨(JS0688)1%(m/v),酵母浸出粉(JS0685)0.5%(m/v),NaCl 1%(m/V)。
分別稱量胰蛋白胨(JS0688)10 g,酵母浸出粉(JS0685)5 g,NaCl (JS0060)10 g,置于1 L燒杯中。加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。滴加5 mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)節(jié)pH至7.0。加去離子水將培養(yǎng)基定容至1 L,高溫高壓滅菌,4℃保存。
52.LB/Amp 培養(yǎng)基
配制好LB培養(yǎng)基后,每升中加入1ml 100 mg/ml的Ampicillin(使培養(yǎng)基中氨芐青霉素的終濃度為100 μg/ml)后均勻混合。4℃保存。JSENB微生物培養(yǎng)原料一站供應。
53.TB培養(yǎng)基
胰蛋白胨1.2%(m/V),酵母浸出粉2.4%(m/V),甘油0.4%(V/V),KH₂PO4 17 mmol/L,K₂HPO4 72 mmol/L。
配制磷酸鹽緩沖液(0.17 mol/L KH₂PO4,0.72 mo/L K₂HPO4)100 ml,滅菌備用。稱取胰蛋白胨(JS0688)12 g,酵母浸出粉(JS0685)24 g,甘油4 ml置于1 L燒杯中。加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解后,高溫高壓滅菌。待溶液冷卻至60℃以下時,加入100 ml的上述滅菌磷酸鹽緩沖液,混合均勻4℃保存。
54.TB/Apm 培養(yǎng)基
TB培養(yǎng)基配制好后,每升加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)。
55.SOB 培養(yǎng)基
胰蛋白胨(JS0688)2%(m/v),酵母浸出粉(JS0685)0.5%(m/V),NaC1 0.05%(m/V),KC1 2.5 mmol/L,MgCl2 10 mmol/L。
1)配制250 mmol/L KCl溶液。在90 ml的去離子水中溶解1.86 g KC1后,定容至100 ml。
2)配制2 mol/L MgCl2溶液。在90 ml的去離子水中溶解19 g MgCl2后,定容至100 ml,滅菌。
3)稱取胰蛋白胨(JS0688)20 g,酵母浸出粉(JS0685)5 g,NaC1 0.5g,置于1 L燒杯中,加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。量取10 ml 250 mmol/L KCl溶液,加入燒杯中。滴加5 mol/L NaOH溶液(約0.2 ml),調(diào)節(jié)pH至7.0。加入去離子水將培養(yǎng)基定容至1 L。高溫高壓滅菌后,4℃保存。
4)使用前加入5 ml 滅菌的2 mol/L MgCl2溶液。
56.SOC培養(yǎng)基
胰蛋白胨(JS0688)2%(m/V),酵母浸出粉(JS0685)0.5%(m/V),NaCl (JS0060)0.05%(m/V),KC1 2.5 mmol/L,MgCl2 10 mmol/L,葡萄糖20 mmol/L。
1)配制1 mol/L 葡萄糖溶液:將18 g葡萄糖溶于90 ml去離子水中,充分溶解后定容至100 ml,用0.22 μm濾膜過濾除菌。
2)向100 ml SOB培養(yǎng)基中加入除菌的1 mol/L葡萄糖溶液2 ml,均勻混合后于4℃保存。
57.2x YT培養(yǎng)基
胰蛋白胨(JS0688)1.6%(m/V),酵母浸出粉(JS0685)1% (m/V),NaC1 0.5%(m/V)。
稱取胰蛋白胨(JS0688)16 g,酵母浸出粉(JS0685)10 g,NaCl (JS0060)5 g置于1 L燒杯中,加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。滴加1 mol/L KOH,調(diào)節(jié)pH至7.0。用去離子水將培養(yǎng)基定容至1 L。高溫高壓后,4℃保存。
58.Φbxbroth培養(yǎng)基
胰蛋白胨(JS0688)2%(m/V),酵母浸出粉(JS0685)0.5%(m/V),MgSO4·7H2O 0.5%(m/V),pH7.5。
59.NZCYM培養(yǎng)基
酵母浸出粉(JS0685)0.5%(m/V),酪蛋白氨基酸0.1%(m/V),NZ胺1%(m/V),NaCl 0.5%(m/V),MgSO4·7H2O 0.2%(m/V)。
60.NZYM 培養(yǎng)基
除不含Casamino Acid(酪蛋白氨基酸)外,其他成分與NZCYM培養(yǎng)基相同。
61.NZM 培養(yǎng)基
除不含酵母浸出粉(JS0685)外,其他成分與NZYM培養(yǎng)基相同。
62. LB/Amp/X-gal/IPTG平板培養(yǎng)基
胰蛋白胨 1%(m/V),酵母浸出粉 0.5%(m/V),NaCl 1%(m/V),氨卡青霉素0.1 mg/ml,IPTG 0.5%(m/V),X-gal 0.04 mg/ml,瓊脂1.5%(m/V)。
1)稱取胰蛋白胨(JS0688)10 g,酵母浸出粉(JS0685)5 g,NaCl(JS0060) 10 g,置于1 L燒杯中。加去離子水約800 ml,充分攪拌溶解。滴加5 mol/L NaOH溶液(約0.2 ml),調(diào)節(jié)pH至7.0。用去離子水將培養(yǎng)基定容至1 L后,加入15 g瓊脂。高溫高壓滅菌。
2)冷卻至60℃左右,加入1 ml氨芐青霉素(100 mg/ml)、1 ml IPTG(24 mg/ml)、2 ml X-gal (20 mg/ml)后均勻混合。
63.TB/Amp/X-gal/IPTG平板培養(yǎng)基
胰蛋白胨1.2%(m/V),酵母浸出粉2.4%(m/V),甘油0.4%(m/V),KH₂PO4 17 mmol/L,K2HPO4 72 mmol/L,氨芐青霉素0.1 mg/ml,IPTG 0.024 mg/ml,X-gal 0.04 mg/ml,瓊脂1.5%(m/V)。
1)配制磷酸鹽緩沖液(0.17 mol/L KH₂PO4,0.72 mol/L K₂HPO4) 100 ml。
2)稱取胰蛋白胨(JS0688)12 g,酵母浸出粉(JS0685)24 g,甘油4 ml,置于1 L燒杯中。加入約800 ml的去離子水,充分攪拌溶解。去離子水定容至1 L后,加入15 g瓊脂。高溫高壓滅菌。
3)冷卻至60℃左右加入100 ml的上述滅菌磷酸鹽緩沖液、1 ml氨芐青霉素(100 mg/ml)、1 ml IPTG(24 mg/ml)、2 ml X-gal(20 mg/ml)后均勻混合。