螢光素酶報(bào)告基因技術(shù)
報(bào)告基因:基因表達(dá)變化或者與基因表達(dá)變化相關(guān)的細(xì)胞事件的一個(gè)指示劑。通常是一種編碼易被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定。
引入報(bào)告基因,通過(guò)很容易被檢測(cè)的報(bào)告基因的表達(dá)來(lái)判斷啟動(dòng)子區(qū)域功能
螢光素酶作為報(bào)告基因的優(yōu)點(diǎn):
✓沒(méi)有內(nèi)源性表達(dá)
✓ 易于定量
✓ 高靈敏度、線性范圍寬
✓ 反應(yīng)迅速
✓ 可實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
螢光素酶報(bào)告基因的應(yīng)用
1.免疫學(xué)檢測(cè)
2.細(xì)胞信號(hào)通路分析
3.轉(zhuǎn)錄因子分析
4.蛋白-蛋白相互作用
5.轉(zhuǎn)錄后修飾
6.調(diào)控元件功能研究(啟動(dòng)子,增強(qiáng)子等)
7.病毒研究
8.細(xì)胞代謝研究
9.干細(xì)胞分化
10.小動(dòng)物活體成像
11.siRNA/miRNA研究
12.配基-受體相互作用
13.細(xì)胞健康研究
14.激酶研究
15.膜受體和細(xì)胞內(nèi)受體激活/結(jié)合研究
16.蛋白降解和PROTAC研究