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MSC間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分享

瀏覽次數(shù):1312 發(fā)布日期:2024-3-11  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
MSC:間充質(zhì)干細(xì)胞,是一群貼壁生長(zhǎng)、形態(tài)類似于成纖維細(xì)胞的多能成體干細(xì)胞,存在于臍帶、骨髓和脂肪組織等多種組織中,并且可以分化成多種不同的組織。
 

Q:為什么培養(yǎng)的MSC細(xì)胞會(huì)卷邊?
A:細(xì)胞的鋪瓶密度不均勻,把培養(yǎng)瓶放到培養(yǎng)箱的時(shí)候可以按照十字法輕輕晃一下,更均勻。

Q:為什么不同品牌的培養(yǎng)基培養(yǎng)效果不一樣?
A:首先,各個(gè)品牌的試劑盒使用說(shuō)明和成分都不同程度有所差異,部分國(guó)產(chǎn)品牌的鋪瓶密度在1E4-2E4個(gè)/cm2,需要大的細(xì)胞起始量。

同立海源生物的MSC試劑盒套裝建議的鋪瓶密度按照不同的傳代數(shù),P1-P3代4E3-6E3個(gè)/cm2,P3-P5代6E3-8E3個(gè)/cm2。建議的鋪瓶體積:5mL/T25瓶, 13mL/T75瓶, 30mL/T175瓶。

Q:添加物有絮狀物怎么處理?
A:可以離心去除,3000rpm, 5min

Q:關(guān)于MSC培養(yǎng)的其它注意事項(xiàng)?
A:添加物不要反復(fù)凍融。培養(yǎng)基提前放到室溫。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分享
1、樣本:凍存的P1代MSC細(xì)胞;
2、實(shí)驗(yàn)組:同立海源生物MSC無(wú)血清培養(yǎng)基;對(duì)照組:國(guó)產(chǎn)競(jìng)品MSC無(wú)血清培養(yǎng)基;
3、傳代時(shí)間:72h;
4、鋪瓶密度:P3代以前,4E3-6E3個(gè)/cm2,P3代以后,8E3個(gè)/cm2;
5、結(jié)論:同立海源生物MSC無(wú)血清培養(yǎng)基較競(jìng)品有更優(yōu)異的擴(kuò)增倍數(shù)。P2-P3代同立海源生物的擴(kuò)增倍數(shù)約是競(jìng)品的3倍(同立海源生物擴(kuò)增12倍,競(jìng)品擴(kuò)增4倍)。相同的鋪瓶密度等實(shí)驗(yàn)條件下,同立海源生物收獲的細(xì)胞數(shù)更多,擴(kuò)增倍數(shù)更高,為客戶節(jié)約更多成本。
 

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圖1 MSC擴(kuò)增倍數(shù)對(duì)比
 

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圖2 MSC細(xì)胞狀態(tài)
 


臨床研究

  • 在肝炎、肝硬化、肝衰竭等肝病的患者中,MSC可以改善免疫調(diào)節(jié),可激活不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能,維持免疫抑制,進(jìn)而抑制肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展。

  • 進(jìn)行疾病治療研究,MSC治療激素耐藥的急性GVHD已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)研究。


干細(xì)胞藥物
至今有1500+關(guān)于MSCs的臨床試驗(yàn)在Clinicaltrials.gov上注冊(cè),目前全球范圍內(nèi)批準(zhǔn)的符合藥品定義的MSCs產(chǎn)品約10種,適應(yīng)癥包括移植物抗宿主病等。
 

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AMMS®MSC試劑盒套裝2.0適用于原代及凍存間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)擴(kuò)增,成分明確,穩(wěn)定性高,操作簡(jiǎn)單,無(wú)需添加谷氨酰胺,無(wú)血清,無(wú)異源成分,擴(kuò)增效率高,表型穩(wěn)定。該產(chǎn)品已通過(guò)美國(guó)FDA的DMF備案(035589),干細(xì)胞藥物臨床實(shí)驗(yàn)最佳選擇。

關(guān)于同立海源
北京同立海源生物科技有限公司,專注細(xì)胞和基因治療(CGT)GMP級(jí)原料試劑研發(fā)及生產(chǎn),為CGT用戶提供產(chǎn)品與服務(wù)的整體解決方案。產(chǎn)品涉及細(xì)胞分選磁珠試劑、真核/原核重組蛋白、無(wú)血清培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒等。

公司建有3200m2的研發(fā)實(shí)驗(yàn)室及GMP級(jí)潔凈車間,包括細(xì)胞分選磁珠開(kāi)發(fā)平臺(tái)、真核與原核蛋白表達(dá)工程平臺(tái)、無(wú)血清培養(yǎng)基開(kāi)發(fā)平臺(tái),通過(guò)ISO13485和ISO9001雙質(zhì)量體系認(rèn)證,部分產(chǎn)品已獲美國(guó)FDA DMF

來(lái)源:北京同立海源生物科技有限公司
聯(lián)系電話:4000105556
E-mail:cuilimei@seafrom.cn

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