細(xì)胞污染的原因與預(yù)防技巧
常見的細(xì)胞污染類型包括細(xì)菌污染、真菌污染和支原體污染，養(yǎng)過細(xì)胞的小伙伴基本上都遇到過，有時(shí)候可能無法區(qū)分是哪種污染，下面讓來了解一下這三種常見污染。
1、細(xì)菌污染
細(xì)胞受到細(xì)菌污染后， 培養(yǎng)基會(huì)變得渾濁 ，算是比較容易發(fā)現(xiàn)和辨別的污染類型。也有的培養(yǎng)液肉眼觀察沒有太大差別，但是在顯微鏡下能觀察到細(xì)胞的形態(tài)有變化，鏡下會(huì)有小黑點(diǎn)且有規(guī)律的運(yùn)動(dòng)（黑膠蟲）。
引起細(xì)菌污染的原因一般是實(shí)驗(yàn)過程中操作不當(dāng)，常見的細(xì)菌污染有枯草桿菌和大腸桿菌。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡。
2、真菌污染
常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、白色念珠菌和酵母菌。真菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液一般不會(huì)變渾濁，但在顯微鏡下可以觀察到各種形狀的菌絲。像念珠菌和酵母菌則會(huì)呈卵圓形散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間。
真菌污染后，細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
3、支原體污染
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體污染發(fā)生率高達(dá)63%，但細(xì)胞被支原體污染時(shí)，其生長(zhǎng)率一般不會(huì)發(fā)生顯著的影響，所以支原體污染與細(xì)菌、真菌污染相比較更難以察覺。當(dāng)你發(fā)現(xiàn)你的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變、細(xì)胞狀態(tài)變差的時(shí)候就要小心一點(diǎn)了，你的細(xì)胞很可能被支原體“玷污”了，除此之外，細(xì)胞膜周圍和細(xì)胞間隙之間會(huì)出現(xiàn)很多不動(dòng)的小黑點(diǎn)，當(dāng)你看到這些小黑點(diǎn)的時(shí)候，基本上就可以“確診”了。
培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后，部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變慢，部分細(xì)胞變圓，從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化，或略有變化，若不及時(shí)處理，還會(huì)產(chǎn)生交叉污染。
一旦細(xì)胞發(fā)生污染，就很難搶救回來，就算勉強(qiáng)救回來了 ，細(xì)胞狀態(tài)也會(huì)受到影響，所以對(duì)待細(xì)胞污染，還是要以預(yù)防為主哦。 細(xì)菌污染尤為常見，一旦操作稍有不當(dāng)，就會(huì)引起細(xì)胞污染，細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細(xì)條沙狀，當(dāng)然，根據(jù)感染的細(xì)菌不同，所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同。防止污染這件事，真的沒有那么簡(jiǎn)單，下面講述一下防污染操作的小技巧：
1、細(xì)菌污染
細(xì)胞受到細(xì)菌污染后， 培養(yǎng)基會(huì)變得渾濁 ，算是比較容易發(fā)現(xiàn)和辨別的污染類型。也有的培養(yǎng)液肉眼觀察沒有太大差別，但是在顯微鏡下能觀察到細(xì)胞的形態(tài)有變化，鏡下會(huì)有小黑點(diǎn)且有規(guī)律的運(yùn)動(dòng)（黑膠蟲）。
引起細(xì)菌污染的原因一般是實(shí)驗(yàn)過程中操作不當(dāng)，常見的細(xì)菌污染有枯草桿菌和大腸桿菌。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡。
2、真菌污染
常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、白色念珠菌和酵母菌。真菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液一般不會(huì)變渾濁，但在顯微鏡下可以觀察到各種形狀的菌絲。像念珠菌和酵母菌則會(huì)呈卵圓形散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間。
真菌污染后，細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
3、支原體污染
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，支原體污染發(fā)生率高達(dá)63%，但細(xì)胞被支原體污染時(shí)，其生長(zhǎng)率一般不會(huì)發(fā)生顯著的影響，所以支原體污染與細(xì)菌、真菌污染相比較更難以察覺。當(dāng)你發(fā)現(xiàn)你的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變、細(xì)胞狀態(tài)變差的時(shí)候就要小心一點(diǎn)了，你的細(xì)胞很可能被支原體“玷污”了，除此之外，細(xì)胞膜周圍和細(xì)胞間隙之間會(huì)出現(xiàn)很多不動(dòng)的小黑點(diǎn)，當(dāng)你看到這些小黑點(diǎn)的時(shí)候，基本上就可以“確診”了。
培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后，部分敏感細(xì)胞可見細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變慢，部分細(xì)胞變圓，從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無明顯變化，或略有變化，若不及時(shí)處理，還會(huì)產(chǎn)生交叉污染。
一旦細(xì)胞發(fā)生污染，就很難搶救回來，就算勉強(qiáng)救回來了 ，細(xì)胞狀態(tài)也會(huì)受到影響，所以對(duì)待細(xì)胞污染，還是要以預(yù)防為主哦。 細(xì)菌污染尤為常見，一旦操作稍有不當(dāng)，就會(huì)引起細(xì)胞污染，細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細(xì)條沙狀，當(dāng)然，根據(jù)感染的細(xì)菌不同，所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同。防止污染這件事，真的沒有那么簡(jiǎn)單，下面講述一下防污染操作的小技巧：
1、操作時(shí)，試劑不用盡量及時(shí)蓋上蓋子，每開一個(gè)試劑要用酒精燈消毒。
2、從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前，用酒精清潔雙手，盡量縮短開門時(shí)間和減少開門次數(shù)。
3、培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。
4、使用移液槍時(shí)，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況，要及時(shí)用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導(dǎo)致細(xì)菌滋生。
5、先取試劑、耗材，再取移液槍、裝槍頭。很多人習(xí)慣先an裝槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染。
6、凍存細(xì)胞時(shí)凍存管蓋子需擰緊，復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認(rèn)蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過凍存管蓋沿，不建議直接扔進(jìn)水中，以免水滲入造成污染。
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