血漿血清樣品白蛋白去除劑使用說明書
瀏覽次數(shù):537 發(fā)布日期:2023-10-18
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
人/動(dòng)物血清和血漿是生物標(biāo)志物鑒定的最佳樣本。然而,大量白蛋白的存在干擾了許多檢測(cè)和功能蛋白
質(zhì)組學(xué)分析。血清白蛋白占總血清蛋白的 50-70%,嚴(yán)重干擾了 1D 和 2D 電泳的分辨率。本試劑可有效去除白蛋白,增加許多檢測(cè)的靈敏度。與基于樹脂結(jié)合白蛋白去除試劑盒(只處理微量樣品)不同,Minute TM白蛋白去除試劑可以處理幾微升到幾毫升的樣品。90%以上的白蛋白可以在不到 5 分鐘內(nèi)被除去。
包裝:20ml(僅限科研使用)。根據(jù)起始樣品體積,試劑足以處理幾十到幾百個(gè)樣品。
運(yùn)輸及儲(chǔ)存:常溫運(yùn)輸,室溫儲(chǔ)存。
附加材料
臺(tái)式高速離心機(jī),去離子水,1X PBS。
操作過程:
1.將血清或血漿樣品加入試管中。為了便于操作,我們建議將 100μl 未稀釋或稀釋的血清或血漿加入 1.5ml 離心管中。
2.加入等量的白蛋白去除劑,上下吹打混勻 10-20 次。
3.在室溫下 14,000-16,000Xg,離心 2-3 分鐘,棄去上清液(白蛋白部分)。慢慢加入 100-200 ul 去離子水,立即取出,清洗在管壁上殘留的白蛋白。根據(jù)下游實(shí)驗(yàn)用 100-200μl 溶解液重新溶解沉淀,用于下游實(shí)驗(yàn)。
可優(yōu)化操作:
1.按照上述方案可一次性去除動(dòng)物血清或血漿中約 70%的白蛋白。為了去除更多的白蛋白,建議將樣品沉淀再次去除白蛋白。例如:用 100ul PBS 重懸步驟 3 中沉淀,并重復(fù)步驟 2-3。
2.如果只有少量的樣品可用,建議用 PBS 稀釋。例如:用 PBS 1:2-1:10 稀釋血清/血漿樣品,并執(zhí)行上述方案。
3.重懸的沉淀中含有血清蛋白和較高濃度的鈉鹽和其他鹽分。它可直接用于 SDS-PAGE,但如果是做 2D 凝膠和其他一些分析,則需要脫鹽處理后才可使用。