Arrayjet生物芯片點(diǎn)樣儀助力病毒中和抗體實(shí)驗(yàn)研究
瀏覽次數(shù):968 發(fā)布日期:2023-10-9
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2023年5月,世衛(wèi)組織宣布新冠疫情逐步結(jié)束。然而回顧疫情的這幾年, 世界各國都投入了大量的資源去開發(fā)相關(guān)的疫苗、藥品和檢測試劑。由于新冠病毒不斷變異成新的毒株,尤其是奧密克戎(Omicron)變異株,其刺突蛋白含有30多個(gè)突變,在受體結(jié)合域至少有15個(gè)突變,極大降低了已有研發(fā)疫苗的中和抗體效果,即疫苗的有效性受到挑戰(zhàn)。雖然病毒的中和抗體試驗(yàn)是評(píng)價(jià)疫苗效力的金標(biāo)準(zhǔn),但該試驗(yàn)需要在生物安全3級(jí)(BL-3)設(shè)施中進(jìn)行,操作繁瑣且耗時(shí)。因此,尋找更佳的替代方法是目前研究努力的方向。
該文章于2022年9月發(fā)表在Proteomics雜志,作者來自于上海交通大學(xué)陶生策教授團(tuán)隊(duì)。在這項(xiàng)研究中,作者將病毒的中和實(shí)驗(yàn)與肽芯片結(jié)合起來,找到了一種利用芯片方式來檢測疫苗效力的新方法。在本研究中,作者招募了14名接種過3劑BBIBP-CorV疫苗的志愿者,采集了16個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)的血清樣本用于檢測血清中和滴度(NT50)和評(píng)估IgG、IgA和IgM抗體的免疫應(yīng)答,并進(jìn)一步比較兩種檢測結(jié)果的相關(guān)性。作者使用英國Arrayjet公司的Marathon Argus生物芯片點(diǎn)樣儀(升級(jí)為新型號(hào)Mercury 100)將肽-BSA偶聯(lián)物、受體結(jié)合域(RBD)蛋白、S蛋白、S1蛋白、陰性對(duì)照(BSA)以及陽性對(duì)照(Human IgG和IgM)點(diǎn)印在PATH玻片上,并于-80℃保存。使用時(shí)將芯片恢復(fù)至室溫,并與待測血清樣本孵育(4℃過夜),洗滌后使用含有熒光標(biāo)記的二抗進(jìn)行孵育,最后使用熒光掃描儀進(jìn)行信號(hào)檢測和分析,具體見圖1。
圖1:工作流程圖--14名接種了3劑滅活病毒疫苗BBIBP-CorV的志愿者參與了本研究,在一年的16個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集每個(gè)供體血清樣本,包括第一次劑量前、第一次劑量后、第二次劑量后和第三次(增強(qiáng)劑)劑量。然后對(duì)蛋白/肽芯片進(jìn)行IgG、IgA和IgM反應(yīng)分析,并對(duì)SARS-CoV-2病毒,即WT株、Delta變異和Omecor變異進(jìn)行中和試驗(yàn)。通過微陣列信號(hào)來預(yù)測病毒中和試驗(yàn)的NT50來評(píng)估疫苗的有效性。
結(jié)果顯示在接種第三劑疫苗后,樣本血清中抗體的NT50有顯著升高,在對(duì)不同毒株的免疫效力測試中,相比于野生型和德爾塔型毒株,奧密克戎型的NT50相對(duì)較小,這與其他研究的結(jié)果一致,表明現(xiàn)有疫苗對(duì)該毒株的免疫效力相對(duì)較低。但是第三針疫苗對(duì)于三種毒株都是十分必要的,能夠顯著提升疫苗的效力,延長疫苗的保護(hù)時(shí)間。
原文鏈接:https://doi.org/10.1002/pmic.202200306
Arrayjet位于英國愛丁堡,專注于提供生物芯片應(yīng)用領(lǐng)域的解決方案及服務(wù)。自2000年公司成立即致力于開發(fā)新型生物樣品噴點(diǎn)方案–噴墨式液體處理平臺(tái),該系統(tǒng)于2006年上市,目前用戶遍布全球27個(gè)國家。
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