如果轉(zhuǎn)染結(jié)果不好，建議檢測(cè)您的細(xì)胞是否有支原體污染。

支原體污染細(xì)胞培養(yǎng)物會(huì)以多種方式影響您的細(xì)胞，其中大多數(shù)會(huì)降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性、可重復(fù)性和一致性。在真核細(xì)胞中觀察到的一些影響可能包括：

由于營養(yǎng)匱乏而導(dǎo)致蛋白質(zhì)、RNA 和 DNA 合成水平的改變

細(xì)胞形態(tài)的變化

細(xì)胞因子釋放增加（或減少）
 

支原體污染影響轉(zhuǎn)染效率

有數(shù)據(jù)表明[1]，由于支原體污染對(duì)真核細(xì)胞的各種影響，與未污染的細(xì)胞相比，支原體污染的細(xì)胞轉(zhuǎn)染后具有較低的基因表達(dá)水平。

轉(zhuǎn)染效率降低很可能是支原體對(duì)其宿主細(xì)胞產(chǎn)生多種影響的結(jié)果，例如它們駐留在細(xì)胞膜中，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞膜過程或爭(zhēng)奪營養(yǎng)物質(zhì)。Yin等人最近證明[2]，支原體污染使細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率降低的部分原因是必需氨基酸 L-精氨酸的缺乏。這種 L-精氨酸缺乏是由微生物酶精氨酸脫亞胺酶 (ADI) 引起的，這種酶在支原體中含量豐富，它們負(fù)責(zé)支原體對(duì) L-精氨酸的分解代謝。

下圖顯示了轉(zhuǎn)染GFP表達(dá)載體的Hela細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞感染支原體（M. Fermantans）時(shí)，GFP表達(dá)水平顯著降低。

除此之外，牢記以下十大守則，遠(yuǎn)離支原體污染！
 

MycoAlert™ 支原體檢測(cè)試劑盒為您的轉(zhuǎn)染效率提供支持

為確保您的細(xì)胞沒有支原體，建議每兩周定期進(jìn)行一次支原體檢測(cè)。除了日常的監(jiān)測(cè)外，我們強(qiáng)烈建議您在轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)開始前檢測(cè)支原體，使用沒有支原體污染的細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，從而進(jìn)一步提升細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率和活率，減少實(shí)驗(yàn)重復(fù)帶來的負(fù)面影響，為您的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)開一個(gè)好頭。

MycoAlert™ 支原體檢測(cè)試劑盒易于使用且易于集成到碎片化時(shí)間中。該檢測(cè)通過簡(jiǎn)單的兩個(gè)步驟，通常可在 20 分鐘內(nèi)獲得結(jié)果。作為一種選擇性生化檢測(cè)，其原理為測(cè)定支原體酶的活性。這些支原體酶廣泛存在于六種主要支原體細(xì)胞培養(yǎng)污染物和絕大多數(shù) 180 種支原體物種中，但不存在于真核細(xì)胞中。