利用熒光染料識(shí)別細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分和監(jiān)測(cè)細(xì)胞毒性或細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)信號(hào)的反應(yīng)是很好的。關(guān)于細(xì)胞的分析,可以從多個(gè)角度切入,如細(xì)胞活性、亞細(xì)胞器的追蹤、細(xì)胞凋亡與自噬的檢測(cè)、細(xì)胞耐藥性、細(xì)胞氧化性壓力、細(xì)胞浦西追蹤、活細(xì)胞衰老檢測(cè)、細(xì)胞內(nèi)蛋白聚集檢測(cè)、細(xì)胞周期檢測(cè)等。針對(duì)上述細(xì)胞研究領(lǐng)域,都有相應(yīng)的檢測(cè)手段和方法去實(shí)現(xiàn),接下來本文就針對(duì)不同的角度來給大家做介紹:
十一種常見細(xì)胞分析方法及相關(guān)檢測(cè)試劑
1.細(xì)胞死亡與自噬
經(jīng)歷凋亡和壞死過程的細(xì)胞會(huì)包括健康細(xì)胞,早期凋亡細(xì)胞,晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞?梢酝ㄟ^對(duì)不同階段的細(xì)胞染不同的顏色來分辨該細(xì)胞系經(jīng)歷到了哪個(gè)階段。推薦使用APOPTOSIS/NECROSIS DETECTION KIT (GFP-CERTIFIED®) (ENZ-51002)這個(gè)試劑盒來進(jìn)行細(xì)胞凋亡和壞死過程的監(jiān)測(cè)。如果是想監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中自噬的情況,可以使用CYTO-ID® AUTOPHAGY DETECTION KIT(ENZ-51031)這個(gè)試劑盒
2.細(xì)胞氧化性壓力
氧化性壓力被定義為活性氧(ROS)的相對(duì)過剩,氧化性壓力相關(guān)的染料包括監(jiān)測(cè)活性氧積累和線粒體功能受損的探針,這兩者都與衰老、癌癥、糖尿病、心血管疾病和神經(jīng)變性的病理有關(guān)。
在活細(xì)胞中對(duì)總活性氧含量及超氧化的定量分析可以通過ROS-ID® TOTAL ROS/SUPEROXIDE DETECTIONKIT(ENZ-51010)試劑盒完成。其原理是ROS的存在通過可普遍檢測(cè)的ROS染料的熒光探針實(shí)現(xiàn)(綠色),而超氧化分析則通過SO-特異性的熒光染料來實(shí)現(xiàn)(黃色)。
對(duì)于線粒體功能受損情況的檢測(cè),可以通過MITO-ID® MEMBRANE POTENTIAL CYTOTOXICITY KIT – (ENZ-51019)來實(shí)現(xiàn)。該試劑盒的檢測(cè)功能是通過雙放射性染料來實(shí)現(xiàn)的,綠色熒光代表單體結(jié)構(gòu),而橙色熒光則代表聚集體結(jié)構(gòu),橙色熒光的下降及證明了MMP(線粒體細(xì)胞膜電位)的下降。
3.鈣離子動(dòng)員反應(yīng)
細(xì)胞內(nèi)的鈣離子是一個(gè)很常見“第二信使”,即胞內(nèi)信號(hào)分子,負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),進(jìn)而影響到其他的細(xì)胞過程,如細(xì)胞分化、遷移、增殖、存活及凋亡。細(xì)胞內(nèi)鈣離子通常會(huì)用做GPCR激活程度的初步指標(biāo)。
使用FLUOFORTE® CALCIUM ASSAY KITS (ENZ-51016 / ENZ-51017)試劑盒可以通過熒光染色的方法對(duì)鈣離子動(dòng)員反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),其染色探針有超強(qiáng)的細(xì)胞穿透性和留存性。
4.亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)染色與活細(xì)胞分析
使用細(xì)胞器選擇性染色劑或染料讓細(xì)胞器顯色是細(xì)胞和組織熒光成像的關(guān)鍵,多色的細(xì)胞器特異性染料可用于共定位研究和監(jiān)測(cè)結(jié)構(gòu)變化對(duì)化學(xué)或環(huán)境脅迫的反應(yīng)。