探討ELISA樣品稀釋倍數(shù)如何確定：

首先你要明確你要測(cè)的樣品的表達(dá)情況。如果低的話，那你就得可以先用一兩個(gè)孔,把你的樣品原液稀釋為一倍,五倍,做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)不用去測(cè)熒光表達(dá),在加完終止液后直接觀察顏色加好,然后確定你樣品檢測(cè)時(shí)的濃度.如果樣品中要檢測(cè)物質(zhì)的表達(dá)較高,那么預(yù)實(shí)驗(yàn)室時(shí)可以適當(dāng)?shù)亩嘞♂屢幌?五倍,十倍,十五倍,最多二十就差不多了.不過呢,在最終確定濃度時(shí)并不一定就是以上西式的濃度,可以去他們之間的數(shù)值的。出現(xiàn)上述情況可能的原因：
1、樣品稀釋
2、從低濃度到高濃度加樣，不換槍頭
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀。落在高吸光值區(qū)間，稍一點(diǎn)偏差對(duì)結(jié)果影響就很大。因此在稀釋倍數(shù)準(zhǔn)確的情況下，落在標(biāo)準(zhǔn)曲線變化急劇區(qū)域數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確。即吸光值小的部分結(jié)果準(zhǔn)確。
1、2現(xiàn)在基本可以排除。這兩次進(jìn)行了自認(rèn)為非常充分的稀釋過程。之前加樣也是低濃度到高濃度不換槍頭。所以，3的可能性比較大。