前言
1月30日CDE通過了杭州厚無生物醫(yī)藥科技有限公司和廣東天科雅生物醫(yī)藥科技有限公司提交的"HV-101注射液"獲得臨床試驗(yàn)?zāi)�示許可，用于治療晚期復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤。這是目前國內(nèi)第四款獲得IND審批的TIL（tumor infiltrating lymphocyte）藥物，在此兩天前廣州智瓴生物醫(yī)藥有限公司的ZLT-001注射液剛作為第三款TIL藥物獲得審批。過繼細(xì)胞免疫療法對于大眾可能是一個(gè)陌生的名詞，但是說到一針天價(jià)的抗癌神器CAR-T，相信不少人都會(huì)恍然大悟。得益于媒體的宣傳，免疫療法已經(jīng)進(jìn)入了大眾的視野，但是過繼細(xì)胞免疫療法是一個(gè)龐大的家族，前文提到的CAR-T療法目前主要應(yīng)用于血液腫瘤，對于病人基數(shù)更廣泛、治療難度更大的實(shí)體瘤來說， TIL療法或許才是最有希望的救星。

TIL療法
人體腫瘤組織內(nèi)浸潤了大量的T細(xì)胞，這些T細(xì)胞中存在部分針對腫瘤特異性抗原的T細(xì)胞，可以深入腫瘤組織內(nèi)部殺傷腫瘤，這些細(xì)胞被稱為TIL即腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞。以此為原理科學(xué)家們開發(fā)了TIL療法用于攻克實(shí)體瘤，TIL的產(chǎn)生可分為兩個(gè)步驟：快速擴(kuò)增前程序pre-REP，以及耗時(shí)14天的REP過程【1】，將腫瘤組織中的T細(xì)胞分離出，在體外進(jìn)行刺激擴(kuò)增，這個(gè)過程尤為關(guān)鍵的地方是為了保證增殖能力，需要使用特定的培養(yǎng)基。早期實(shí)驗(yàn)是添加大量的IL-2進(jìn)行擴(kuò)增，但是科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)這樣會(huì)導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸發(fā)生。隨后經(jīng)過長期探索制定了除使用IL-2外，需添加細(xì)胞因子IL-7、IL-12、IL-15以及單克隆抗體CD3、CD134以及PD-1的擴(kuò)增模式。TIL擴(kuò)增這一步驟十分關(guān)鍵，在很大程度上決定了后續(xù)治療的效果以及不良反應(yīng)的控制。在細(xì)胞增殖達(dá)到我們需要的數(shù)量級(jí)時(shí)回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而擴(kuò)大免疫應(yīng)答，治療原發(fā)或繼發(fā)腫瘤。
 

Fig1. TIL療法的基本步驟

國際TIL療法最新布局
相比于其他的細(xì)胞療法，TIL療法擁有更明顯的優(yōu)勢。首先TIL療法的免疫細(xì)胞來自于腫瘤組織，而其他細(xì)胞免疫療法大部分來源取自血液，這直接決定了TIL細(xì)胞具有更強(qiáng)的腫瘤識(shí)別能力。另一方面，TIL療法由具有多個(gè)T細(xì)胞抗原受體（TCR）克隆的T細(xì)胞組成，能夠識(shí)別一系列腫瘤抗原。TIL療法這些優(yōu)勢解決了實(shí)體瘤具有高度異質(zhì)性腫瘤抗原的難題，彌補(bǔ)了目前免疫治療無法攻克實(shí)體瘤的空白。

TIL療法領(lǐng)域的龍頭企業(yè)當(dāng)屬總部位于San Carlos的Iovance，公司從TIL療法奠基人Steve Rosenberg教授手中獲得了包括化合物和生產(chǎn)技術(shù)等多項(xiàng)相關(guān)專利許可，同時(shí)抓住了唯快不破的原則，開發(fā)了GMP生產(chǎn)流程，將整個(gè)過程縮短至22天，極大的提高了治療效率。公司官網(wǎng)公布了TIL管線研發(fā)還涉及TIL聯(lián)合用藥方案覆蓋多種癌癥，進(jìn)一步擴(kuò)大自身的商業(yè)版圖。

 

   

   
Fig2. Iovance官網(wǎng)展示的TIL療法過程以及在研管線

在美國的另一邊，立足于Dallas的Instil Bio公司于2018年成立，研發(fā)了使用共刺激抗原受體（Co-Stimulatory Antigen Receptor,CoStAR）研發(fā)工程化TIL的技術(shù)， CoStAR分子由葉酸受體α（FRα）激活，在腫瘤微環(huán)境中提供強(qiáng)大的共刺激信號(hào)，可以提升TIL的增殖能力以及在腫瘤微環(huán)境中的活性。目前公司的拳頭研發(fā)產(chǎn)品ITIL-306的首次人體試驗(yàn)采用無外源輸注IL-2的臨床方案，希望進(jìn)一步提高安全性。
 

Fig3. Instil Bio在研管線

國內(nèi)TIL療法布局
我國專注于TIL療法的研發(fā)企業(yè)也在迅速發(fā)展，雖然起步較晚，但是我國相關(guān)企業(yè)在許多技術(shù)環(huán)節(jié)甚至已經(jīng)達(dá)到國際領(lǐng)先水平，華賽伯曼CTO趙毅博士在接受采訪時(shí)曾表示：“華賽伯曼利用穿刺方式獲取病人腫瘤組織樣本，僅0.01g即可實(shí)現(xiàn)后續(xù)至少90%成功率的細(xì)胞培養(yǎng)，作為參考TIL領(lǐng)軍者Iovance公司則需要1.5g的樣本。同時(shí)華賽伯曼的實(shí)驗(yàn)室且僅需16天就能擴(kuò)增到治療所需數(shù)量級(jí)的細(xì)胞進(jìn)行回輸，這無疑是一個(gè)巨大的領(lǐng)先優(yōu)勢。
 

Fig4. 華賽伯曼在研管線

我國的TIL療法領(lǐng)頭羊沙礫生物已經(jīng)在研發(fā)經(jīng)過基因修飾的下一代TIL療法，公司擁有三大核心技術(shù)平臺(tái)：StemTexp®平臺(tái)、ImmuT Finder®平臺(tái)以及StaViral®平臺(tái)。用于治療轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)實(shí)體瘤的GT101注射液是國內(nèi)首個(gè)獲批臨床的TIL療法，其中ImmuT Finder®平臺(tái)，已建立多個(gè)體內(nèi)及體外腫瘤模型，能更好地模擬TIL在病人體內(nèi)的真實(shí)情況，同時(shí)平臺(tái)可以對TIL細(xì)胞進(jìn)行全基因組的篩選，可以縮短過程至3個(gè)月，相較于目前其他公司選擇的高通量篩選方法，極大的提高了篩選效率。
 

Fig5. 沙礫生物在研管線

除此之外勁風(fēng)生物、君賽生物、西比曼生物、卡替醫(yī)療也在TIL領(lǐng)域快馬加鞭推進(jìn)研發(fā)進(jìn)程。在這場群雄逐鹿的混戰(zhàn)中，各家企業(yè)都有著自己的秘密武器，勁風(fēng)生物致力于將生物信息學(xué)和人工智能技術(shù)融入自身的研發(fā)過程，已達(dá)到多元視角提高研發(fā)生產(chǎn)效率的目的；君賽生物在研的GC101TIL 是全球首個(gè)無需清淋、無需IL-2注射的天然TIL細(xì)胞治療藥物；西比曼生物的C-TIL051則獲得了FDA批準(zhǔn)，C-TIL051使用了公司專有的工藝，在人體內(nèi)可以更快、更有效地達(dá)到臨床劑量；卡替醫(yī)療研發(fā)的第四代產(chǎn)品——“超強(qiáng)型cTIL”，僅需采集外周血中的TIL細(xì)胞，極大地拓展了適用人群。另外資本方面，根據(jù)《2022創(chuàng)新藥白皮書》顯示2022年我國TIL融資事件共有3起涉及資金9.17億元【2】。
 

自1986年Steve Rosenberg教授通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明TIL的治療有效性，到1988年發(fā)表的第一個(gè)TIL積極臨床試驗(yàn)結(jié)果，短短幾十年的研發(fā)進(jìn)程，TIL憑借自身明顯的優(yōu)勢，成為最有希望幫助人類攻克實(shí)體瘤的秘密武器。我國的TIL研發(fā)企業(yè)起步較晚，但是各個(gè)企業(yè)都力爭在各個(gè)技術(shù)層面尋求突破，建立自身獨(dú)特的市場競爭力，靠技術(shù)壁壘為自己爭取一席之地。在免疫治療勢不可擋的發(fā)展趨勢下，我們有理由相信目前臨床在研的相關(guān)藥物會(huì)給我們帶來一個(gè)又一個(gè)驚喜。

TIL所需重要原料

CD3

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
GMP-TL101	抗人CD3單克隆抗體（人源化）	500μg

✦產(chǎn)品性能

Fig1：CD3單抗純度檢測：SDS-PAGE
 

Fig2：CD3單抗純度檢測：HPLC
 

Fig3：CD3單抗與Jurkat細(xì)胞結(jié)合率

 

Fig4：T細(xì)胞增殖
 

IL-2

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
GMP-TL777	重組人IL-2蛋白(高效型)	50μg

✦產(chǎn)品性能

Fig1：IL-2純度測試數(shù)據(jù)：SDS-PAGE

 

Fig2：IL-2活性測試數(shù)據(jù)

IL-7

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
GMP-TL506	重組人IL-7蛋白	50μg/100μg

✦產(chǎn)品性能

Fig1：IL-7純度測試數(shù)據(jù):SDS-PAGE

 

Fig2：重組人IL-7蛋白，可刺激PBMC增殖，比活性1×10⁷IU/mg(參考標(biāo)準(zhǔn)NIBSC代碼：90/530)

IL-15

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
GMP-TL801	重組人IL-15蛋白 （長效型）	50μg/100μg

✦產(chǎn)品性能

Fig1：重組人IL-15蛋白（長效型）純度檢測:SDS-PAGE

 

解讀文獻(xiàn)：
【1】 Zhao Y, Deng J, Rao S, Guo S, Shen J, Du F, Wu X, Chen Y, Li M, Chen M, Li X, Li W, Gu L, Sun Y, Zhang Z, Wen Q, Xiao Z, Li J. Tumor Infiltrating Lymphocyte (TIL) Therapy for Solid Tumor Treatment: Progressions and Challenges. Cancers (Basel). 2022 Aug 27;14(17):4160.

【2】 《2022創(chuàng)新藥白皮書》