UMNSAH/DF-1細(xì)胞正常生長(zhǎng)照片
 

細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱：UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細(xì)胞)

細(xì)胞別稱：UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1

細(xì)胞類型：成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)條件：DMEM+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：UMNSAH/DF-1細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞成纖維細(xì)胞株，自發(fā)永生化。分離的原代雞胚成纖維細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，傳代直到衰老，在培養(yǎng)過程中保持細(xì)胞在30%到60%密度，不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖，說明UMNSAH/DF-1細(xì)胞是永生化而沒有轉(zhuǎn)化。UMNSAH/DF-1細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

客戶養(yǎng)的UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞，現(xiàn)在是第5次傳代，這次是1:3傳代，用的是上圖胰酶1毫升，消化2一3分鐘，反饋是此次傳代的第2天很多細(xì)胞不貼壁，幫忙看一下。

小尚解答

消化時(shí)間太長(zhǎng)了，該細(xì)胞消化時(shí)間短，注意控制消化時(shí)間及吹打力度。細(xì)胞消化至變圓可以輕松吹下時(shí)即可終止消化，不能消化至完全漂浮。對(duì)于消化這步，客戶如果對(duì)該細(xì)胞經(jīng)驗(yàn)不多，無法準(zhǔn)確掌控胰酶作用時(shí)間，建議客戶按照下述操作：

胰酶首先復(fù)溫到室溫后加入細(xì)胞，放入37度培養(yǎng)箱，然后每隔30秒，即吹打下細(xì)胞（此時(shí)吹打細(xì)胞應(yīng)盡量輕柔，不能強(qiáng)行將細(xì)胞吹下，否則細(xì)胞可能出現(xiàn)機(jī)械損傷），如果能夠吹打散細(xì)胞，說明細(xì)胞消化完成可以終止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重復(fù)操作。消化完成后加3-4ML完全培養(yǎng)基終止消化，混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞懸液900-1000rpm離心3min，棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞，再離心后，用完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時(shí)碎片比較少，傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗一次。傳代24h后可以觀察細(xì)胞，若死亡細(xì)胞及碎片較多建議PBS潤(rùn)洗下貼壁的細(xì)胞，再加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

2.目前細(xì)胞活力較差，死細(xì)胞偏多，建議靜置培養(yǎng)一天看一下，若明天細(xì)胞仍然不貼壁就不建議繼續(xù)培養(yǎng)了。若有保種的凍存細(xì)胞可以重新復(fù)蘇培養(yǎng)。

 

產(chǎn) 品

1【SNL-006】UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細(xì)胞)

2【SNLM-006】雞胚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

公 司 簡(jiǎn) 介

武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城，專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證，獲得高新技術(shù)企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)�！　�

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購(gòu)；細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種，同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類；公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等�！　�

公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國(guó)內(nèi)各大高校生物實(shí)驗(yàn)室、生物研究機(jī)構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)！尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商！