細(xì)胞污染,似乎是每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)員過來人的“洗禮”。對(duì)于即將踏入細(xì)胞房的師弟,師妹,怎樣才能更好地規(guī)避師兄、師姐們?cè)?jīng)遇到的細(xì)胞污染問題呢?今天帶大家了解主要的細(xì)胞污染類型和預(yù)防措施吧。
細(xì)胞污染類型
細(xì)菌污染
* 細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基可能在4-6小時(shí)呈現(xiàn)混濁。
* 有時(shí)稍加震蕩,變會(huì)有很多混濁物漂起。
* 在顯微鏡下呈黑色細(xì)沙狀,或背景有大量黑點(diǎn)。
* 可能造成細(xì)胞增殖緩慢或形態(tài)上的改變(多角、多核等),胞質(zhì)中產(chǎn)生空泡、細(xì)胞漂浮凋亡。
了解了細(xì)菌污染的這些特征以后,同學(xué)們又有疑問了,那么細(xì)菌菌體能在顯微鏡下看到嗎?答案是部分細(xì)菌可以在顯微鏡下看到具體形態(tài)。因?yàn)椴煌N類的細(xì)菌大小不同,只有形態(tài)較大的菌才能在顯微鏡下分辨出具體形態(tài)哦,如下圖所示:
空培的完全培養(yǎng)液(250X)
G+菌(革蘭氏染色法)
看完細(xì)菌的形態(tài)以后,又有同學(xué)有疑問了:細(xì)菌菌體和細(xì)胞碎片有什么區(qū)別呢?為了讓大家更好地分辨這兩者的差異,我編了如下口訣,方便大家快速理解和記憶。這里,強(qiáng)調(diào)一下第四點(diǎn),由于細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞有毒害作用,而這種毒害作用會(huì)隨著內(nèi)毒素含量和時(shí)間的積累使細(xì)胞漸漸容顏盡毀。而細(xì)胞碎片的產(chǎn)生則可能是“生物大滅絕般”的現(xiàn)象,表現(xiàn)為細(xì)胞大批凋亡,可能的原因是細(xì)胞的生存環(huán)境受到嚴(yán)重威脅,例如完全培養(yǎng)液發(fā)生變化,pH值發(fā)生變化,滲透壓發(fā)生變化等使細(xì)胞“瀕臨絕境”、“全軍覆沒”、“爛成一團(tuán)漿糊”。
細(xì)菌菌體和細(xì)胞碎片的區(qū)別
如何拯救我們的“細(xì)胞寶寶“呢,伙伴們,不用怕,Absin生物推出針對(duì)細(xì)菌的抗生素系列,除了青鏈最常用的抗生素,卡那霉素、硫酸慶大霉素也是不錯(cuò)的選擇,交替使用抗生素可以有效預(yù)防細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生。
貨號(hào) | 抗生素 | 規(guī)格 | 作用對(duì)象 | 使用比例 | 儲(chǔ)存條件 |
abs42020125 | 卡那霉素B硫酸鹽 | 250mg | 細(xì)菌(G+,G-)支原體 | 母液濃度10mg/ml(無菌水溶解),工作濃度稀釋1:100 | -20℃ |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10ml | 細(xì)菌(G+,G-)支原體 | 稀釋1:200 | -20℃ |
abs9244 | 青霉素-鏈霉素溶液(100×雙抗) | 100ml | 細(xì)菌(G+,G-) | 稀釋1:100 | -20℃ |
abs9246 | 青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液(100×三抗) | 100ml | 細(xì)菌(G+,G-)、真菌(酵母菌,霉菌等) | 稀釋1:100 | -20℃ |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100×三抗) | 100ml | 細(xì)菌(G+,G-) | 稀釋1:100 | -20℃ |
除此以外,環(huán)境預(yù)防也不容小覷,水盤、水浴鍋除菌劑已經(jīng)為大家備上了,有效預(yù)防水浴環(huán)境污染。僅僅水浴環(huán)境還不夠,培養(yǎng)箱滅菌噴壺助力細(xì)胞房微生物安全。使用方便,噴涂即可?上鞠鹉z手套、超凈臺(tái)面、桌面、顯微鏡臺(tái)、試劑瓶身等物體表面,噴涂完全濕潤,不需擦拭,自然風(fēng)干。此外,還有培養(yǎng)箱除菌試劑,移除細(xì)胞后,直接對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)箱的隔板、內(nèi)壁噴灑適量,也可倒出少許,將脫脂棉球浸泡后擦拭使用。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 使用方法 | 作用對(duì)象 |
abs9374 | 水盤抑菌劑 | 20ml | 稀釋比例1:500 | 可有效殺滅細(xì)菌、芽孢、支原體、真菌(酵母菌、霉菌)和病毒;無毒;對(duì)不銹鋼無腐蝕性;不揮發(fā)。 |
abs44071148 | 制霉菌素 | 1g | 稀釋比例1:500 | |
abs9372 | 培養(yǎng)箱除菌劑 | 480ml | 移除細(xì)胞后,直接對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)箱的隔板、內(nèi)壁噴灑適量,也可倒出少許,將脫脂棉球浸泡后擦拭使用。 | |
abs9373 | 細(xì)胞房除菌劑 | 480ml | 直接對(duì)細(xì)胞房的死角、墻面、空間進(jìn)行噴灑,也可倒出少許,將脫脂棉球浸泡后擦拭使用。 |
今天的介紹到這里就結(jié)束啦~
小伙伴們學(xué)會(huì)分辨這些污染了嗎?
下期我們將繼續(xù)介紹細(xì)胞污染之真菌篇
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