細(xì) 胞 基本信息
 

細(xì)胞名稱：293 人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞別稱：Hek293; HEK-293; HEK/293; HEK 293; HEK;293; 293; 293 HEK; 293 Ad5; Graham 293; Graham-293; Human Embryonic Kidney 293
 

細(xì)胞類型：上皮細(xì)胞

細(xì)胞簡介：293 [HEK-293]細(xì)胞人類胚胎的腎臟中分離的表現(xiàn)出上皮形態(tài)的細(xì)胞，后經(jīng)剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞，293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出，293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主，可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。293細(xì)胞表達(dá)玻連蛋白。293細(xì)胞可用于工業(yè)生物技術(shù)和毒理學(xué)研究，功效測試和病毒測試中也有應(yīng)用。
 

293細(xì)胞正常生長形態(tài)照片

操 作 實(shí) 例

293細(xì)胞收貨后細(xì)胞都是圓形聚集的，有的沒有貼壁，細(xì)胞是不是死了？
 

小尚回答：
 

照片上看細(xì)胞活性是沒有問題的。由于293細(xì)胞對溫度敏感，且貼壁弱，T25發(fā)貨運(yùn)輸過程可能會有部分細(xì)胞邊緣漂浮是正常現(xiàn)象，并不是細(xì)胞死亡或者狀態(tài)不佳。

1.反饋圖片上看大部分細(xì)胞都貼壁了，漂浮細(xì)胞不多的話可以按照正常操作消化重新接種。該細(xì)胞消化時(shí)間較短，注意控制消化時(shí)間不能過長，消化時(shí)間通常會在1min內(nèi)。

2.若T25瓶內(nèi)漂浮的細(xì)胞團(tuán)塊較多，可以按照下述步驟離心收集，再進(jìn)行消化處理。

①收集所有培養(yǎng)基及漂浮細(xì)胞到無菌50ml離心管，1000rpm，5min離心收集細(xì)胞沉淀。

②取培養(yǎng)基上清到4℃保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過度到客戶自己的培養(yǎng)基。在原50ml離心管中加入5mlPBS重懸細(xì)胞沉淀，盡量吹散后1000rpm，5min離心，棄上清。

③加入1ml胰酶輕輕震蕩混勻，勿直接吹打細(xì)胞。然后放入培養(yǎng)箱消化1min左右，消化完成后用移液器輕輕吹打幾下，吹散細(xì)胞后立刻加5ml完培終止消化。1000rpm，5min離心，棄上清。

④加入1ml完培重懸細(xì)胞接種到新培養(yǎng)瓶中。T25加10-12ml培養(yǎng)基培養(yǎng)，通常2-3天左右換液一次，若培養(yǎng)基變黃及時(shí)換液，以維持一個(gè)相對穩(wěn)定的培養(yǎng)條件，有利于細(xì)胞活正常生長。

⑤原T25剩余貼壁細(xì)胞密度大于70%，可以正常消化傳代；貼壁細(xì)胞較少可以加培養(yǎng)基正常培養(yǎng)至70%密度以上消化傳代；若幾乎沒有細(xì)胞則可以丟棄。

⑥若出現(xiàn)傳代后次日貼壁較少的情況，可以收集培養(yǎng)基及漂浮細(xì)胞到離心管，離心收集未貼壁細(xì)胞，然后加新培養(yǎng)基盡量重懸吹散后接種回原培養(yǎng)瓶讓細(xì)胞繼續(xù)貼壁，注意小心操作，避免將已貼壁細(xì)胞吹下。
 

注意事項(xiàng)

1.由于293系列細(xì)胞（包括293、293T、293F等幾乎所有衍生系）均貼壁較弱，且對溫度非常敏感，低溫時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞變圓甚至脫落的現(xiàn)象，因此細(xì)胞觀察時(shí)應(yīng)注意不要室溫放置太長時(shí)間、不要使用過低溫度的培養(yǎng)基、胰酶、PBS等試劑處理細(xì)胞。

2.運(yùn)輸后出現(xiàn)細(xì)胞變圓脫落情況時(shí)，脫落現(xiàn)象不嚴(yán)重僅是變圓時(shí)可以平衡細(xì)胞2h以上再按正常步驟消化細(xì)胞即可，若脫落較嚴(yán)重甚至大量聚團(tuán)漂浮時(shí)建議直接收集細(xì)胞離心后消化再重新接種。

3.由于293細(xì)胞本身貼壁較弱細(xì)胞消化時(shí)間本身較短，必須控制消化時(shí)間和吹打力度，避免細(xì)胞消化或吹打死亡過多導(dǎo)致無法正常貼壁生長。消化時(shí)間過長、吹打力度過大等均可能導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡或者不長，尤其是脫落后的細(xì)胞會更敏感，切記注意操作細(xì)節(jié)。
 

產(chǎn)品推薦

【SNL-014】293(人胚腎細(xì)胞)

【SNLM-014】293 [HEK-293]細(xì)胞完全培養(yǎng)基

【SNT-002】0.25%胰酶（含EDTA）
 

公 司 簡 介

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武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城，專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動物房，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證，獲得高新技術(shù)企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)�！　�

公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購；細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種，同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類；公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等�！　�

公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實(shí)驗(yàn)室、生物研究機(jī)構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)！尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商！