國家藥監(jiān)局于2019年9月發(fā)布了《疫苗上市后生產(chǎn)工藝變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（征求意見稿），如果疫苗生產(chǎn)要進(jìn)行一些符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的原輔料的變更，只需備案，即通過變更流程的簡化，鼓勵(lì)企業(yè)進(jìn)行無動(dòng)物源性原輔料的變更。
 

在現(xiàn)代生物制藥生產(chǎn)過程中，動(dòng)物源性原料的使用存在的最大潛在危險(xiǎn)是可能會(huì)引入人畜共患病的潛在病毒。

Trypelectase重組胰蛋白酶專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計(jì)，提供高效、非動(dòng)物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。

Trypelectase重組胰蛋白酶的氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌 （E.coli） 重組表達(dá)生產(chǎn)�？商娲鷤鹘y(tǒng)動(dòng)物源胰酶，常用于疫苗，干細(xì)胞，免疫細(xì)胞治療等細(xì)胞培養(yǎng)過程中貼壁細(xì)胞消化。

活力單位：25℃，pH7.6，反應(yīng)體系3.2ml (1cm 光路)，每分鐘酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定義為一個(gè)活力單位。

主要用途
細(xì)胞培養(yǎng)：
（1）原代細(xì)胞的獲取，用于組織塊的消化解離
（2）用于貼壁細(xì)胞的傳代消化
（3）用于微載體方法培養(yǎng)的細(xì)胞消化

可用于解離一系列的貼壁哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括VERO、HEK 293、A529、MRC-5、CEF、CHO、原生人角質(zhì)細(xì)胞以及胚胎干細(xì)胞。

特點(diǎn):
1. GMP生產(chǎn)環(huán)境、藥典標(biāo)準(zhǔn)

2. 穩(wěn)定性

3. 消化效率高，細(xì)胞活力好
細(xì)胞消化實(shí)驗(yàn)
T25培養(yǎng)的細(xì)胞達(dá)到90%以上融合后進(jìn)行消化傳代，去掉細(xì)胞培養(yǎng)基，加入10mL PBSS洗一次。之后每瓶加入0.5mL 0.5mg/ml(1x PBS 溶解)的胰酶消化液，放置37℃消化3min，用4.5 mL 完全培養(yǎng)基中和胰酶，并使用移液器輕輕吹散細(xì)胞，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測細(xì)胞數(shù)和活率。將0.33 ×106個(gè)細(xì)胞傳代到T25培養(yǎng)瓶中。傳代24h后觀察細(xì)胞貼壁情況。

重組牛胰蛋白酶(EC 3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶，存在于許多脊椎 動(dòng)物的消化系統(tǒng)中，作為消化酶而起作用。它能切割賴氨酸或精氨酸殘基中的羧基端肽鏈（羧基端如果是脯氨酸除外），由大腸桿菌 （E.coli） 重組表達(dá)生產(chǎn)，具有高活性、高純度、GMP生產(chǎn)、符合藥典要求等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于國內(nèi)外第三代胰島素制備。
 

酶活：212U/mg protein，活力單位：30℃，pH8.1，反應(yīng)體 系3.0ml (1cm 光路)，每分鐘酶解TAME使253nm下的吸收值增加 0.001定義為一個(gè)U單位。

特點(diǎn)

• 清真生物制品
• 對胰島素類似物特異性切割效果好
• 重組表達(dá)，無動(dòng)物源，可以排除病毒殘留的風(fēng)險(xiǎn)和動(dòng)物來源的潛在風(fēng)險(xiǎn)
• GMP生產(chǎn)，批次穩(wěn)定性好

應(yīng)用

• 第三代胰島素的工業(yè)生產(chǎn)
• 蛋白質(zhì)組學(xué)的生物學(xué)研究實(shí)驗(yàn)
• 溶解微形態(tài)的血栓和治療胰腺炎癥