培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無(wú)法合成的化合物，即生長(zhǎng)因子。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。
                             

培養(yǎng)基包含 碳水、含氮、無(wú)機(jī)鹽、維生素、水 成分，現(xiàn)介紹它們的各自的作用：
1.NaHCO3的作用是什么？
與二氧化碳一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定。

2.丙酮酸鈉的作用是什么？
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒(méi)有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.

3.加入HEPES有何好處？
培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸氫鹽，它可提供營(yíng)養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES是一種很強(qiáng)的Buffer，加入HEPES能使細(xì)胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES的貯存液濃度一般為1M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM，即5ml 1M的HEPES加入到200ml完全培養(yǎng)基中。

4.酚紅的作用是什么？
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。

5.谷氨酰胺的作用是什么？
幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。
試驗(yàn)操作中常配制高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支），分裝使用，-20℃保存。使用時(shí)，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。
                            

培養(yǎng)基的滅菌及使用：
1、每次配置時(shí)，要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi)，查看其開(kāi)瓶日期及瓶口密封性，保證其未變質(zhì)，并且未吸潮。
2、培養(yǎng)基配置時(shí)，稱(chēng)量要準(zhǔn)確，包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。
3、一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌，未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長(zhǎng)時(shí)間放置，更不可隔夜。
4、滅菌時(shí)要保證恒溫、恒壓，同時(shí)要保證有效滅菌時(shí)間。
5、滅菌過(guò)的培養(yǎng)基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過(guò) 3 天。而且要遵循“先入先出”原則，先配制的要先使用。
6、在使用時(shí)，要根據(jù)當(dāng)班次的使用量，用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài)，然后及時(shí)調(diào)低水域溫度（先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上）待用，千萬(wàn)不可長(zhǎng)時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。
7、做產(chǎn)品微生物檢測(cè)時(shí)，傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右，不可過(guò)燙，避免將菌燙死；也不可過(guò)涼，化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固，不便于觀察結(jié)果。
8、每瓶培養(yǎng)基均要做空白。
9、盡量集中做樣，避免頻繁打開(kāi)同一瓶培養(yǎng)基瓶塞，增大培養(yǎng)基的污染幾率，出現(xiàn)誤差結(jié)果。
10、培養(yǎng)基剩余過(guò)少時(shí)，可先將其傾倒成空白用板。