基因分型是通過使用生物學(xué)試驗(yàn)檢查個(gè)體的DNA序列的過程，也是將目標(biāo)序列與另一個(gè)體的序列或參考序列進(jìn)行比較來確定個(gè)體的遺傳構(gòu)成（基因型）差異的過程。

PCR 是一種常見的基因分型方法，用于對(duì)樣本的基因型進(jìn)行擴(kuò)增和鑒定。但由于基因分型通常需要檢測成百上千份樣品，樣品處理、提取基因組DNA、PCR擴(kuò)增目的基因的工作量使得基因分型PCR非常耗時(shí)，因此，我們提供了幾個(gè)簡單的PCR優(yōu)化方法，幫助您克服基因分型中的常見障礙。

01.省略基因組DNA提取
傳統(tǒng)做法是從組織樣品中純化基因組DNA進(jìn)行基因分型PCR。即使使用快速提取試劑盒，該過程也可能至少需要0.5-1小時(shí)，并需要使用離心機(jī)和加熱等實(shí)驗(yàn)室專用設(shè)備。使用到的提取試劑還需要相應(yīng)的處理，需要較多的實(shí)驗(yàn)時(shí)間和實(shí)驗(yàn)成本。
 

而采用直接PCR試劑盒，可以將組織樣本直接用于PCR反應(yīng)擴(kuò)增，無需進(jìn)行DNA純化，也無需使用特殊設(shè)備和進(jìn)行其他試劑處理。直接PCR使用原始樣品（例如鼠尾、鼠耳或毛囊發(fā)）進(jìn)行簡單裂解即可進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)，可節(jié)省大量時(shí)間。裂解后的樣品還可以低溫長期保存，以便進(jìn)行后續(xù)其他實(shí)驗(yàn)。
 

02.使用PCR預(yù)混液減少配制時(shí)間和污染
預(yù)混為2×Mix的產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液等PCR所需的成分，使用時(shí)僅需加入DNA模板和引物即可進(jìn)行擴(kuò)增，降低了PCR 實(shí)驗(yàn)配置出錯(cuò)、試劑污染等的風(fēng)險(xiǎn)，也節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
 

03.縮短PCR反應(yīng)時(shí)間
以下三個(gè)方面縮短 PCR 反應(yīng)時(shí)間：

• 使用快速PCR酶，可以以15-30 sec/kb的速度合成DNA（替代傳統(tǒng)的60 sec/kb）的酶。

• 結(jié)合使用快速PCR儀，例如可以快速升高或降低至所需循環(huán)溫度的PCR儀。

• 選擇儀器適用的“快速”耗材產(chǎn)品，低容的耗材高度更低，最大程度減少了蒸發(fā)的影響并提高熱傳導(dǎo)效率，而薄壁PCR管可實(shí)現(xiàn)更好的熱傳遞。

04.擴(kuò)增后PCR 產(chǎn)物直接上樣電泳
傳統(tǒng)的PCR產(chǎn)物檢測方法是在電泳之前，將PCR產(chǎn)物與一定比例的含染料的上樣緩沖液混合后上樣到凝膠孔。這個(gè)過程看似微不足道，但涉及到計(jì)算所需體積、制備上樣染料、吸取PCR樣品，最后進(jìn)行混合。這些步驟需要時(shí)間及額外的耗材。而選擇使用含染料的直接PCR 預(yù)混液可省略這些步驟，擴(kuò)增完成后直接上樣進(jìn)行電泳檢測。
 

 

05.選擇通用性預(yù)混液
麥伯生物提供的Magic Direct PCR Mix是已含染料的直接PCR預(yù)混液，可耐受植物中的多糖多酚、全血、血清、血漿中的肝素、高濃度的血紅蛋白、甘油三脂、乙醇、胍鹽、SDS等強(qiáng)PCR抑制劑，適用于血液、動(dòng)物組織、植物葉片、種子、果實(shí)等多種樣本的直接PCR擴(kuò)增，讓您無需重新選擇和采購試劑即可進(jìn)行多種樣本的分型實(shí)驗(yàn)，高效、快速、方便。