快速構(gòu)建細(xì)胞株的使用策略
瀏覽次數(shù):1687 發(fā)布日期:2020-10-12
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細(xì)胞株構(gòu)建是廣大做細(xì)胞研究科研工作者及生物技術(shù)員常用的一種技術(shù),目的就是通過(guò)構(gòu)建一個(gè)高產(chǎn)感興趣蛋白的細(xì)胞,而細(xì)胞株構(gòu)建就是實(shí)現(xiàn)這個(gè)目的的過(guò)程。這是一個(gè)簡(jiǎn)單的操作,卻也是一個(gè)復(fù)雜的操作。簡(jiǎn)單在于,從表面上看,并不需要很高超的操作技巧;復(fù)雜在于,這是一個(gè)時(shí)間周期長(zhǎng)、操作步驟多、易污染、易混亂的重復(fù)勞動(dòng)工作。
細(xì)胞株構(gòu)建所涉及的流程包括:
獲得表達(dá)感興趣蛋白的某些細(xì)胞;
測(cè)試表達(dá)的蛋白;
克隆選擇的細(xì)胞;
篩選高表達(dá)的細(xì)胞;
優(yōu)化培養(yǎng)條件;
放大培養(yǎng)。
細(xì)胞株構(gòu)建示意圖
在細(xì)胞株構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,首先關(guān)鍵要關(guān)注的問(wèn)題是如何解決那些重復(fù)操作、通量高、易污染、需要大量人力操作的實(shí)驗(yàn)步驟,如梯度稀釋、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞換液、高通量篩選、克隆挑選等步驟,從而使得上下游更通暢,并保證數(shù)據(jù)的完整性,避免無(wú)謂的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
貝克曼庫(kù)爾特生命科學(xué)自動(dòng)化產(chǎn)品線推出以Biomek自動(dòng)化工作站為核心的自動(dòng)化系統(tǒng),同時(shí)也可以根據(jù)需要實(shí)現(xiàn)的高通量、自動(dòng)化目的,選擇合適的配套設(shè)備,如培養(yǎng)箱、試劑耗材堆棧和檢測(cè)設(shè)備等。
來(lái)自挪威的歐洲最大的獨(dú)立研究機(jī)構(gòu)之一的SINTEF則選擇主要實(shí)現(xiàn)細(xì)胞自動(dòng)化培養(yǎng)操作,他們通過(guò)Biomek i7自動(dòng)化工作站完成主要的液體操作,并輔以傾斜模塊、孵育模塊、振蕩模塊、試劑加載模塊、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)儀等實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作,并通過(guò)HEPA高效層流罩保證細(xì)胞工作環(huán)境。觀看以下視頻,看看SINTEF具體如何實(shí)現(xiàn)的:
自動(dòng)化細(xì)胞培養(yǎng)
關(guān)于貝克曼自動(dòng)化整合部門(mén)介紹:
貝克曼自動(dòng)化整合部門(mén)位于美國(guó)Indianapolis,該部門(mén)位于Beckman質(zhì)量管理系統(tǒng)下,并經(jīng)過(guò)ISO9001認(rèn)證,部門(mén)配備整合實(shí)驗(yàn)室,完成整合設(shè)備的研發(fā)。
整合部門(mén)人員包含機(jī)械、電子、軟件、系統(tǒng)工程師,和工程師支持、項(xiàng)目管理人員。整合部門(mén)人員平均工作經(jīng)驗(yàn)為12年,超過(guò)15年整合系統(tǒng)工作經(jīng)驗(yàn)人員為13位。
整合部門(mén)每年平均完成400例整合項(xiàng)目。
如有特殊功能開(kāi)發(fā),Beckman團(tuán)隊(duì)可協(xié)助客戶進(jìn)行軟硬件開(kāi)發(fā)。
中國(guó)整合部門(mén)包含項(xiàng)目設(shè)計(jì)及方法開(kāi)發(fā)軟件工程師7人,硬件安裝工程師6人。國(guó)內(nèi)能自主完成整合設(shè)備的設(shè)計(jì)搭建。近五年完成整合項(xiàng)目20余例,其中大型整合系統(tǒng)10例(>5個(gè)外設(shè))。
* 以上內(nèi)容涉及設(shè)備僅適用于科研和工業(yè),不用于臨床診斷。