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生物學(xué)應(yīng)用廣泛的花青染料-分類與選型

瀏覽次數(shù):2754 發(fā)布日期:2020-6-2  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

今天百螢給大家?guī)Я说氖腔ㄇ嗨丶捌溲苌锏慕榻B和推薦。與其他經(jīng)典熒光染料相比,花青染料的熒光信號(hào)如何?可用于哪些領(lǐng)域?光譜性質(zhì)是怎樣的?效果良好的花青類產(chǎn)品都有哪些?能修飾哪些反應(yīng)基團(tuán)?感興趣的朋友一起來看看吧!


熒光素及其衍生物

“花青”這個(gè)名詞是來自于聚次甲基組合成染料家族中的,它是一個(gè)非系統(tǒng)名稱,cyanin一詞源自英語單詞“ cyan”,通常表示藍(lán)綠色。 花青染料的摩爾消光系數(shù)(約150,000至300,000 M-1cm-1)非常大,結(jié)合適度的量子產(chǎn)率,使它可以產(chǎn)生極其明亮的熒光信號(hào)。 事實(shí)證明,花青在許多領(lǐng)域都非常有用,包括成像技術(shù),生物學(xué),激光技術(shù)和分析化學(xué)等。 AAT Bioquest提供了最多的花青染料集合,它們可用作多種生物學(xué)應(yīng)用的分子探針。 對(duì)于某些生物學(xué)應(yīng)用,花青可以有利地替代其他常規(guī)染料,例如熒光素和羅丹明。


花青染料Cy3和Cy5
 

圖1.Cy3(左),Cy5(中)和Cy7(右)染料的最大吸光度(虛線)和發(fā)射光(陰影區(qū)域)。
 

在花青染料中,最受歡迎的是發(fā)出黃綠色熒光(約550 nm激發(fā),約570 nm發(fā)射)的Cy3和在紅色區(qū)域發(fā)出熒光(約650 nm激發(fā),約670 nm發(fā)射)的Cy5。 由于它們的光譜重疊極小,通常將Cy3和Cy5結(jié)合起來進(jìn)行檢測(cè)。Cy3可以通過各種熒光儀,成像儀和帶有TRITC標(biāo)準(zhǔn)濾波片的顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。 由于其較高的摩爾消光系數(shù),Cy3染料也很容易在電泳凝膠和溶液中用肉眼觀察。 Cy5的消光系數(shù)也非常高(在凝膠電泳中肉眼可檢測(cè)到1 nmol),并且在紅色區(qū)域具有最大的熒光發(fā)射峰,因此Cy5成為了紅色熒光染料的流行替代品。

光譜性質(zhì)

產(chǎn)品名稱 激發(fā)光線 Ex / Em(nm) 濾波片組 消光系數(shù)(ε) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy3 532nm 554/568nm Cy3 / TRITC 150,000 0.15
Cy5 633-647nm 650/669nm Cy5 250,000 0.27
Cy7 730nm 754/778nm Cy7 250,000 0.3

磺化與非磺化花青

磺化和非磺化花青染料具有非常相似的熒光特性,在許多應(yīng)用中它們可以互換使用。染料之間的差別主要在于它們的溶解度。在標(biāo)記生物分子之前,非磺化花青必須溶解在有機(jī)溶劑中,如DMF或DMSO。而磺化花青可用于水性條件(帶電荷的磺酸鹽基團(tuán)可減少染料和共軛物的聚集)。為了通過對(duì)水或水緩沖液的透析純化,必須使用磺化花青有效去除未反應(yīng)的染料。通過凝膠過濾、色譜或電泳純化對(duì)磺化和非磺化菁都是合適的。

表2.磺化和非磺化Cy3,Cy5和Cy7染料的光譜比較。

  Cy3 Cy5 Cy7
形式 磺化 非磺化 磺化 非磺化 磺化 非磺化
Ex / Em(nm) 554/568 650/669 754/778
過濾片組 Cy/ TRITC Cy5 Cy7
ε(消光系數(shù) cm-1M-1) 150,000 140,000 250,000 230,000 250,000 250,000
Φ(熒光量子產(chǎn)率) 0.10 0.07 0.27 0.16 0.12 0.2
貨號(hào) 263 191 268 195 161 198

花青產(chǎn)品類型

我們提供多種花青產(chǎn)品選擇,包括用于標(biāo)記生物分子,綴合物,指示劑等的活性染料和結(jié)合試劑盒。


花青反應(yīng)性染料

用于修飾以下反應(yīng)基團(tuán)的Cy染料標(biāo)記的化學(xué)試劑:

巰基 羰基 點(diǎn)擊化學(xué)

花青染料標(biāo)記的熒光二抗綴合物

從多種花青標(biāo)記的熒光二抗和鏈霉親和素偶聯(lián)物中選擇,用于一抗的信號(hào)放大檢測(cè):

山羊抗小鼠IgG 山羊抗兔IgG 鏈霉親和素

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