液滴，因其微型化及高通量的特性，已成為一種用于微生物培養(yǎng)的有力工具，但在液滴中進(jìn)行微生物的長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，微生物的生長(zhǎng)（生長(zhǎng)速度及形態(tài)）及其分泌的各種代謝物，均會(huì)對(duì)液滴的穩(wěn)定性造成一定的影響，可能會(huì)出現(xiàn)液滴“破裂”或者液滴互相融合現(xiàn)象，此外，部分微生物的生長(zhǎng)對(duì)微環(huán)境特別敏感，液滴失去穩(wěn)定性，便意味著我們很有可能獲取到不準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。因此，在液滴制備中，我們需要對(duì)液滴進(jìn)行“加固”，常見的一種辦法是加入表面活性劑，一方面它對(duì)多種微生物的具有良好生物相容性，另一方面它能為液滴提供良好的穩(wěn)定性。
本文通過對(duì)比3種不同濃度下的3類表面活性劑的液滴細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，以液滴穩(wěn)定性和液滴包裹率來評(píng)估3種表面活性劑的性能。
 
試劑與方法
在Novec HFE7500電子氟化液（3M）中加入dSurf表面活性劑（記為實(shí)驗(yàn)組1）和另外兩種市場(chǎng)已有表面活性劑（分別記為對(duì)比組1和對(duì)比組2），以作為液滴中的連續(xù)相（油相），所加入表面活性劑濃度分別為0.5%、2%和5%（w/w）。
實(shí)驗(yàn)過程簡(jiǎn)述：從健康志愿者皮膚上采集微生物群落（非單一菌株），以用于制備液滴，使用壓力泵（Fluigent，F(xiàn)low EZ）作為壓力源，在PDMS液滴芯片上，以7-10kHz的速率，生成體積為20pl的液滴，并將液滴收集在37℃的容器中進(jìn)行孵育，不直接暴露在空氣中。在孵育時(shí)間的第0、1、3和7天時(shí)，取顯微鏡下的液滴成像圖片，以進(jìn)行液滴觀察。
 
液滴穩(wěn)定性對(duì)比
在液滴剛開始生成時(shí)，3種不同濃度的表面活性劑均能立即穩(wěn)定液滴，看不出差異。