在藥物的早期研發(fā)中,Assay development 即方法學(xué)/模型的開發(fā)和優(yōu)化,是從龐大的化合物庫中篩選到hit中至關(guān)重要的一步。一個成功的Assay能顯著提高HTS的效率和成功率;反之,湊合的Assay只能得到湊合的Hit,或者什么也得不到。從嚴(yán)格意義上來說,方法學(xué)的開發(fā)和優(yōu)化是個復(fù)雜的過程,無論是基于生化水平還是細(xì)胞水平,眾多因素都會涉及其中,如酶和底物的濃度、蛋白和緩沖液的比例、ph值、溫度、細(xì)胞個數(shù)、孵育的時間、離子濃度等。由此可見,Assay development 相較于HTS,有更高的技術(shù)含量,需要建立在對靶點、實驗條件和技術(shù)手段充分理解的基礎(chǔ)之上,因此也更需要更好的技術(shù)和設(shè)備來支持。
來自于歐洲最大的獨立技術(shù)開發(fā)和創(chuàng)新集團之一的英國SPT Labtech公司產(chǎn)品dragonfly® discovery,是專門為藥物研發(fā)中的方法學(xué)開發(fā)/建立以及隨之的HTS所開發(fā)的一個創(chuàng)新性自動化移液平臺,和市場上現(xiàn)有的移液工作站相比,有其獨有的優(yōu)勢、特色和互補性,下面由小編為大家一一道來。
dragonfly® discovery:
Any liquid !
Any volumn!
Any well !
1、無視液體粘度,無需調(diào)整移液參數(shù)
dragonfly® discover采用獨有的固相置換技術(shù)(Positive Replacement)技術(shù),固相置換又名容積置換,顧名思義是利用固體體積的變化來置換液體,即槍頭內(nèi)的活塞直接和待分液體接觸,無需像傳統(tǒng)的移液設(shè)備那樣存在空氣柱作為媒介推動吸液或加樣。dragonfly® discovery 槍頭內(nèi)活塞移動的體積就是液體吸入或打出的體積,相比于傳統(tǒng)的氣相或液相置換:
1) 不會產(chǎn)生空氣柱和氣泡;
2) 不受液體粘稠度影響;
3) 不會堵塞槍頭;
4) 不需要進行校準(zhǔn)和液體定義;
可輕松實現(xiàn)粘稠液體如甘油、吐溫,基因組DNA、乙醇、BSA甚至是細(xì)胞和微珠的準(zhǔn)確和高效化移液。
槍頭原理模擬圖 槍頭實際效果
2、超大的量程范圍:200 nL – 4 mL
超高的移液精度:12.5 nL
納升(nL)即微升(uL)的1/1000,是極其微小的體積單位。目前市場上傳統(tǒng)的液體工作站通常為微升級反應(yīng)體系,一旦移液體積低于1微升,移液的準(zhǔn)確性和CV值則大大降低。此外,很多傳統(tǒng)的移液設(shè)備僅適用于96和384孔板,無法在1536孔板進行靈活的加樣。SPT Labtech公司dragonfly® discovery采用獨有的固相置換式槍頭,無需更換槍頭和核心,單次加樣范圍從200 nL到4 mL,即可實現(xiàn)量程從納升(nL)到毫升(mL)級別的跨越,可進行1:20000的稀釋,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過各種傳統(tǒng)的液體工作站工作范圍。同時,dragonfly® discovery采用高精密度的步進電機,使得這種大量程的加樣范圍依舊可以保持在12.5 nL的移液精度。
300 nL 分液
3、快速:多種液體的組合分液;384板<30秒,1536孔板<2分鐘
dragonfly® discovery通過高精度步進電機來控制活塞柱持續(xù)移動來噴射液體,從而達(dá)到極塊的分液速度。同時,為了避免分液過快可能引起的溶液濺射,dragonfly® discovery 采用滴落式分液的方式,在開始分液時減慢速度,待孔內(nèi)有部分液體后,再逐步加快,以此防止微孔內(nèi)的溶液濺射,引起不必要的交叉污染。此外,dragonfly® discovery可同時或獨立地分液多至10種不同的化合物、酶、底物和緩沖液等反應(yīng)試劑;配合獨有的槍頭,整個體系連同加樣槽的死體積可低至30 uL,且槽內(nèi)剩余的液體可回收,極大節(jié)省了珍貴的反應(yīng)試劑。在速度上,分液1-5 uL體積,384孔板僅需26秒,1536孔板低至2分鐘,極大地提高了實驗效率和靈活度。
384孔板,5 uL 1536孔板 , 2 uL
4、多至10個獨立通道,非接觸式加樣避免交叉污染
dragonfly® discovery可選擇多至10個獨立通道,最多對10種不同的蛋白、緩沖液、酶、底物、細(xì)胞甚至微珠等進行組合加樣,可以十分方便地進行梯度稀釋和試劑組分優(yōu)化,彼此不受干擾。儀器使用簡便,只需將待分液試劑倒入加樣槽,擰上槍頭,5分鐘即可完成實驗設(shè)置。此外,由于儀器內(nèi)部無泵,無微流控和管路,因此設(shè)備無需額外的清洗維護和校準(zhǔn),用戶體驗度佳,尤其適用于平臺。
將試劑倒入槽中,輕松完成儀器設(shè)置
5、簡潔靈活的圖形化軟件
dragonfly® discovery 為方法學(xué)建立和優(yōu)化開發(fā)了一套專門的軟件,通過簡潔友好的圖形化界面,用戶可輕松編輯需要添加的反應(yīng)試劑,確定加樣濃度和范圍,選擇合適的優(yōu)化方法和布局,即可完成軟件設(shè)置。如圖下所示,在y軟件界面的左側(cè)錄入待分液的反應(yīng)試劑如底物、酶、緩沖液和蛋白以及對應(yīng)的濃度,在左下方選擇每種試劑的加樣模式(梯度稀釋方式如線性或倍數(shù);加樣布局和濃度范圍等),完成設(shè)置后,即可輕松實現(xiàn)分液。
6、可升級為HTS模塊,實現(xiàn)高通量分液
除了常規(guī)的模塊外,dragonfly® discovery 可升級為在機身后部放置大體積容量瓶,通過自動進樣系統(tǒng),配合機械臂和疊板架,可實現(xiàn)無人值守,使其成為一臺兼容Assay development和HTS功能,靈活且多用途的分液設(shè)備,滿足您不同的實驗需求。
來自英國SPT Labtech公司的納升級獨立靈活式分液平臺dragonfly® discovery,目前被廣泛用于Assay development、HTS、 細(xì)胞功能學(xué)研究和基因組學(xué)研究中不同復(fù)雜試劑和反應(yīng)物如:酶、蛋白、緩沖液,qPCR mix和細(xì)胞的組合分液,以其靈活和多樣化的功能、優(yōu)越的性能和在市場上與其他品牌獨有的互補性,正日益受到各大跨國藥企、生物公司、CRO和科研機構(gòu)的青睞。
dragonfly® discovery的特色總結(jié)如下:
1. 靈活:多至10個通道,可完全獨立加樣;
2. 超大量程:200 nL – 4 mL;超高精度:12.5 nL;
3. 快速:384孔板小于26秒;1536孔板小于 2min;
4. 超低的死體積,小于30 uL,且可回收;
5. 固相置換式分液原理:
無視液體粘度(70 %甘油,乙醇,吐溫,BSA,粘稠的基因組DNA等);
無需液體定義和校準(zhǔn);
不產(chǎn)生空氣柱和小液泡;
6. 專門為方法學(xué)建立/HTS開發(fā)的軟件;
7. 易于自動化整合,自動進樣,實現(xiàn)高通量分液。