牛陀螺狀細胞貼壁培養(yǎng)技巧
瀏覽次數(shù):866 發(fā)布日期:2019-12-26
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BT牛陀螺狀細胞貼壁生長特性:
1、一個一個做!防止污染,和消化細胞時間的不均勻。
2、原則上,為了避免細胞系之間的污染,應(yīng)該一個一個的做。但是如果你能保證無菌操作的原則,也能把握好各種貼壁細胞系消化的時間,是可以同時做,這樣效率高。建議你剛開始一個一個的做,熟練以后根據(jù)具體情況決定如何做。
3、4個可以同時做,時間到了用移液槍給4個瓶加含血清的培養(yǎng)基終止就行。
4、新手的話強烈建議一個一個處理細胞,特別是消化,除非你養(yǎng)的細胞對消化都不敏感,不然很容易消化過度或者不到位。另外同時處理多個細胞容易出現(xiàn)細胞間交叉污染,一旦污染基本沒救,比細菌污染還要麻煩。
5、剛開始還是一個一個來,BT牛陀螺狀細胞消化的時間與細胞的來源有很大關(guān)系,貼壁性強的細胞,需要消化的時間較長。一般除了貼壁性強的癌細胞外,細胞消化時間1-3min,還有胰蛋白酶的濃度有關(guān)系,濃度高的消化時間要短一些,不然會消化過了,對于細胞的生長不好。你可以在分散打入胰蛋白酶時,輕晃培養(yǎng)瓶,在顯微鏡下看見細胞開始變亮,皺縮,卷邊的時候就加入培養(yǎng)液或者血清終止消化。
選擇牛陀螺狀細胞有3個理由:
1、細胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細胞之一;
2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養(yǎng)實驗,效果更佳。