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DNA提取磁珠特性的全面講解

瀏覽次數(shù):2081 發(fā)布日期:2019-12-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
具有醫(yī)療器械憑證的DNA提取磁珠
       吉恩特生物的DNA提取磁珠是國內(nèi)首批具有醫(yī)療器械生產(chǎn)備案憑證的DNA提取磁珠(備案號:豫洛食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20180004號),是洛陽吉恩特生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的高分子磁性微球,主要用于磁珠法核酸提取過程中DNA、RNA的吸附與釋放。吉恩特生物通過嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝,完善的質(zhì)檢工藝,成為各大測序公司、體外診斷公司、基因檢測公司的長期供應(yīng)商,為廣大用戶提供穩(wěn)定可靠的高質(zhì)量生物磁珠及磁珠法試劑盒。

一、懸浮時間
       懸浮時間的長短對加樣均一性有較大影響,懸浮時間越長的DNA提取磁珠,加樣均一性越好。GNT系列的磁珠緩沖液,懸浮時間能穩(wěn)定在5-10min或30-40min。(測試方法:1ml磁珠溶液,沉降至500ul所用的時間)
  

二、磁吸時間
       磁吸時間對實(shí)驗(yàn)操作效率有較大影響,磁吸越快的磁珠,操作體驗(yàn)越好,效率越高。磁吸時間在20-30s以內(nèi),有些可以達(dá)到瞬間磁吸的效果。(測試方法:將10ul磁珠溶液置于1ml純水中,完全磁吸的時間)

三、吸附效率
       吸附效率是用戶關(guān)心的參數(shù),任何核酸提取實(shí)驗(yàn),得率越高越好,吉恩特生物通過不斷的優(yōu)化與驗(yàn)證,將DNA提取磁珠的吸附效率做到穩(wěn)定。誠然,在磁珠法核酸提取的過程中,磁珠需要搭配若干種試劑共同完成提取工作,這其中會有較多的不穩(wěn)定因素,影響磁珠真實(shí)的吸附效率。因此,我們建議用回收效率來反應(yīng)DNA提取磁珠真實(shí)的吸附效率。在這套體系中,有固定濃度的樣本,固定濃度的結(jié)合液,變量就是不同批次的磁珠,用這套體系得出的磁珠吸附效率,更加客觀,參考價(jià)值也更高。
▲使用不同批次的磁珠,對已知濃度的DNA進(jìn)行回收,回收效率一致(80%左右),
證明磁珠的批次穩(wěn)定性良好

四、磁珠熱穩(wěn)定性
       DNA提取磁珠熱穩(wěn)定性是經(jīng)常被使用者忽略的參數(shù)之一,這里的熱穩(wěn)定性是指將磁珠置于洗脫液并加熱一段時間,磁吸完全后,對上清液進(jìn)行紫外分光光度計(jì)的分析。此時,熱穩(wěn)定性較差的磁珠,會在260nm處有吸光值,若是有這樣的情況出現(xiàn),理論上來講,這樣的磁珠是完全不能使用的,因?yàn)榇蟛糠值暮怂崽崛?shí)驗(yàn),都需要加熱步驟,而由于加熱引起的磁珠本身的數(shù)據(jù)波動,會使實(shí)驗(yàn)結(jié)果很不穩(wěn)定,對使用者造成困擾。通常情況下,如若某些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)高的離譜,就要考慮磁珠本身的熱穩(wěn)定性是否存在影響。
▲將20ul磁珠置于50ul洗脫液中,70℃水浴30min后,進(jìn)行上清濃度檢測,檢測結(jié)果良好

五、磁珠重懸性
       磁珠重懸性也經(jīng)常被使用者忽略,重懸性是指DNA提取磁珠自然沉降后,再次回到懸浮狀態(tài)的難易程度。有些磁珠自然沉降后,容易結(jié)塊,且結(jié)塊較難被打散,使用過程中容易造成加樣的不均一,盡管這種現(xiàn)象可以通過渦旋震蕩進(jìn)行改善,但重懸性差較差的磁珠,增加了使用者的操作難度,所以選擇一款重懸性好的磁珠,才是解決該問題的根本辦法。
▲磁珠重懸性

六、磁珠儲存條件和保質(zhì)期
       儲存條件和保質(zhì)期也是用戶經(jīng)常關(guān)心的問題,由于儲存不當(dāng)或產(chǎn)品存放時間過長引起的問題,也令人頭疼,較難追溯。GNT系列的磁珠通過嚴(yán)格的驗(yàn)證,可實(shí)現(xiàn)全年室溫保存(洛陽地區(qū)全年室溫在2-32℃之間),且理化性質(zhì)均保持穩(wěn)定。
▲將磁珠置于室溫(2-32℃,無需控溫)保存不同時間,回收效率不變(80%左右)

七、磁珠滅菌后的驗(yàn)證
       磁珠能否進(jìn)行滅菌,也是客戶經(jīng)常提起的問題。我們對吉恩特生物的DNA提取磁珠,進(jìn)行121℃滅菌30min的處理,并作相關(guān)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示除了磁珠濃度會略微增加外(水分蒸發(fā)),吸附效率、純度、懸浮時間等參數(shù)并未發(fā)生變化,保持穩(wěn)定。
▲對比磁珠滅菌前后的相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),除濃度略微增加外,其余參數(shù)均能保持穩(wěn)定性

八、磁珠用于核酸提取的驗(yàn)證
       說了這么多,使用DNA提取磁珠的終目的是要搭配試劑進(jìn)行高質(zhì)量的核酸提取,GNT系列的磁珠配合相關(guān)試劑,可以實(shí)現(xiàn)各類樣本的核酸提取。(PS:GNT-B02血液基因組DNA提取試劑盒現(xiàn)免費(fèi)試用,全程常溫操作,無需任何加熱步驟,而且再也不用擔(dān)心A260/A230比值偏低啦)
▲使用不同批次的磁珠,對200ul血液樣本進(jìn)行基因組DNA提取,得率和純度均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)
來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司
聯(lián)系電話:136 0866 9917
E-mail:3155927605@qq.com

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