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制備RNA樣品的方法如何選擇

瀏覽次數(shù):1436 發(fā)布日期:2019-12-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

您在進(jìn)行科研工作的時(shí)候,是否經(jīng)常遇到過以下問題:

1.我的RNA樣本量很少,我不想要總RNA;

2.我想檢測RNA上m6A甲基化水平,我不想用復(fù)雜的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)方法;

3.我想研究退行性神經(jīng)疾病,我不想使用傳統(tǒng)的鍍銀染色法。

【解決方案一】:

在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。如在一些表達(dá)譜研究中,最好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA。而在研究分析未剪接的RNA前體時(shí),提取細(xì)胞核(Nuclear )RNA會是一個(gè)更好的選擇。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能分別提供2種試劑盒來提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,不僅費(fèi)用高昂,而且浪費(fèi)大量的材料與時(shí)間。

為此,艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦Norgen Biotek品牌的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒(貨號:21000)。一個(gè)樣品,同時(shí)分別提取細(xì)胞質(zhì)RNA與細(xì)胞核RNA,提取的RNA可直接用于下游應(yīng)用:RT-PCR, qRT-PCR, RNA-Seq, Northern blotting, chip-Arrays等。
【解決方案二】:

目前檢測m6A所用的技術(shù)手段包括高通量測序、比色法以及液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)等。高通量測序偏向單堿基水平鑒定m6A;而比色法與LC-MS/MS比較相似,也是從整體水平上檢測RNA上m6A甲基化水平,Epigentek公司推出的這款名為EpiQuik M6A RNA Methylation Quantification Kit試劑盒(貨號:P-9005),原理與ELISA反應(yīng)類似,經(jīng)過優(yōu)化后檢測m6A靈敏度會更高,操作更為簡便,不限種屬。


【解決方案三】:

神經(jīng)元變性的原因和影響是神經(jīng)科學(xué)家們的主要關(guān)注點(diǎn),目前已有多種檢測神經(jīng)元變性的方法,包括鍍銀染色和FJC染色方法。FJC 染色是近年來新興的一種神經(jīng)元熒光染色技術(shù),不僅避免了常規(guī)鍍銀染色的繁瑣和高成本,而且可以與其它熒光素標(biāo)記物結(jié)合進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?/p>

目前用于退變神經(jīng)元染色的FJ 染料主要有FJ、FJB 和FJC 三種。與FJ 和FJB 染料相比,F(xiàn)luoro-Jade C具有最高的信號背景比,以及最高的分辨率。這轉(zhuǎn)化為對退化神經(jīng)元的最大對比度和親和力的染色。這使其不僅可以定位神經(jīng)細(xì)胞體的退化,還可以定位遠(yuǎn)端樹突,軸突和末端。該染料具有高度抗褪色性,幾乎與所有組織學(xué)處理和染色方案兼容。Fluoro-Jade C可染色所有退化神經(jīng)元。Biosensis公司推出了的全球暢銷Fluoro-Jade C (FJC) 退化神經(jīng)元染色試劑盒(貨號:TR-100-FJ)。


《Nature & Cell高分發(fā)表文章》

Norgen-Cat# 21000

Neuronal hemoglobin affects dopaminergic cells’ response to stressCell Death and Disease. 2017.

Satellite RNAs promote pancreatic oncogenic processes via the dysfunction of YBX1Nature Communications. 2016.

Epigentek-Cat# P-9005

Transcription Impacts the Efficiency of mRNA Translation via Co-transcriptional N6-adenosine Methylation. Cell. 2017. 

Biosensis-Cat# TR-100-FJ

Retrograde transport of TrkB-containing autophagosomes via the adaptor AP-2 mediates neuronal complexity and prevents neurodegeneration. Nature Communications. 2017.

Hydrogen inhalation during normoxic resuscitation improves neurological outcome in a rat model of cardiac arrest independently of targeted temperature management. Circulation. 2014. 

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來源:艾美捷科技有限公司
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