細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的一種技術(shù)。根據(jù)哺乳動物細(xì)胞蛋白表達流程,細(xì)胞培養(yǎng)完成后需進行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,根據(jù)不同的實驗?zāi)康目蛇x擇不同的轉(zhuǎn)染方法。目前,常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法主要分為三類途徑:物理介導(dǎo)(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學(xué)介導(dǎo)(脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物介導(dǎo)法)、生物介導(dǎo)(病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染)。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染原理 | 主要特點 | 適用類型 |
陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法 | 帶正電荷的脂質(zhì)體靠靜電作用和DNA 結(jié)合形成 DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用進入細(xì)胞 | ·操作簡便 ·適用于各種裸露的DNA和RNA片段 ·適合轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞 ·對DNA濃度有一定要求 ·重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時需除血清 |
瞬時轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 所有細(xì)胞 |
DEAE-右旋糖苷法 | 帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物,復(fù)合物和帶負(fù)電的細(xì)胞膜接觸后而被細(xì)胞膜攝取 | ·有一定的毒性 ·操作簡單,適用性廣 ·重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時需除血清 |
瞬時轉(zhuǎn)染 |
磷酸鈣法 | 磷酸鈣能夠促進外源DNA和細(xì)胞的結(jié)合,磷酸鈣-DNA復(fù)合物能夠附著到細(xì)胞表面,并通過內(nèi)吞作用進入細(xì)胞 | ·操作簡單 ·對DNA濃度要求高 ·適用性有局限(不適用于原代細(xì)胞) |
瞬時轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 |
電穿孔法 | 高脈沖的電壓破壞細(xì)胞膜,在細(xì)胞膜表面形成孔道,DNA通過孔道進入細(xì)胞 | ·適用性廣,適用于質(zhì)粒和幾十kb的基因組片段 ·針對不同細(xì)胞要優(yōu)化實驗條件細(xì)胞 ·致死率較高 |
瞬時轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 所有細(xì)胞 |
顯微注射法 | 利用顯微操作系統(tǒng)和顯微注射技術(shù)將 DNA直接注入到細(xì)胞中 |
·整合率較高,適用于工程改造和轉(zhuǎn)基因動物的建立 ·操作復(fù)雜,且需要昂貴精密的設(shè)備 ·外源基因的整合位點和拷貝數(shù)無法控制,會導(dǎo)致片段缺失、突變 |
瞬時轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 |
逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染 | 通過病毒的膜蛋白和細(xì)胞表面的受體相互作用而進入細(xì)胞,利用宿主細(xì)胞酶自行轉(zhuǎn)錄復(fù)制合成DNA,并隨機整合到細(xì)胞基因組中 | ·轉(zhuǎn)染效率高,適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染利用病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染,外源基因整合較穩(wěn)定 ·逆轉(zhuǎn)錄病毒只選擇感染分裂細(xì)胞 ·容納外源基因長度<8kb |
瞬時轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 特定細(xì)胞 |
隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該具有如下特點:高效轉(zhuǎn)染;安全;低細(xì)胞毒性;方法簡單;省時、經(jīng)濟。
作為NCBI推薦的基因克隆供應(yīng)商,GeneCopoeia推出5款不同類型的轉(zhuǎn)染試劑:
※ EndoFectin™ Max(基于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染原理的轉(zhuǎn)染試劑)
產(chǎn)品特性
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EF003 | EndoFectin™ Max轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL) | 廣泛適用于多種細(xì)胞 |
EF004 | EndoFectin™ Max轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL) |
※ CRISPR-Fectin™(CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉(zhuǎn)染試劑)
產(chǎn)品特性
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EF015 | CRISPR-Fectin™ 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL) | 優(yōu)化的CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉(zhuǎn)染試劑?膳cGeneHero™ Cas9蛋白配合使用 |
EF016 | CRISPR-Fectin™ 轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL) |
※ EndoFectin™ Expi293(為Expi293F懸浮細(xì)胞進行優(yōu)化設(shè)計)
產(chǎn)品特性
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EF007 | EndoFectin™ Expi293 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL) | 專注轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞293F,轉(zhuǎn)染效率極高 |
EF009 | EndoFectin™ Expi293 增強轉(zhuǎn)染試劑盒 (1L 轉(zhuǎn)染用量) | |
EF010 | EndoFectin™ Expi293 增強轉(zhuǎn)染試劑盒 (10L 轉(zhuǎn)染用量) |
※ EndoFectin™ HepG2(特別為常用細(xì)胞系HepG2進行優(yōu)化設(shè)計)
產(chǎn)品特性
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EF005 | EndoFectin™ HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL) | 為常用細(xì)胞系HepG2進行優(yōu)化設(shè)計 |
EF006 | EndoFectin™ HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL) |
※ EndoFectin™ Lenti(一種基于陽離子轉(zhuǎn)染原理的、高效的轉(zhuǎn)染試劑)
產(chǎn)品特性
貨號 | 名稱 | 適用性 |
EF001 | EndoFectin™ Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (1 ml) | 轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,可收獲更高滴度的慢病毒 |
EF002 | EndoFectin™ Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (3 ml)) |
GeneCopoeia致力于為國內(nèi)生命科學(xué)工作者提供一流的產(chǎn)品和及時周到的服務(wù),通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產(chǎn)品線,加速您的研究進程。作為GeneCopoeia在中國的區(qū)域一級代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產(chǎn)品以及客戶訂制化服務(wù)。
作為GeneCopoeia在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia公司產(chǎn)品以及客戶訂制化服務(wù)。