HybriMore助力雜交瘤細(xì)胞融合和單克隆化
瀏覽次數(shù):2096 發(fā)布日期:2019-11-14
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單克隆抗體自問世以來,以其特有的高度專一性迅速占領(lǐng)醫(yī)學(xué)的多個(gè)領(lǐng)域,在蛋白親和純化、醫(yī)學(xué)診斷、腫瘤導(dǎo)向治療以及放射性免疫成像技術(shù)方面發(fā)揮著重要的作用,因此單克隆抗體的制備技術(shù)之一——雜交瘤技術(shù)也越來越重要。
雜交瘤技術(shù)是指將骨髓瘤細(xì)胞和免疫淋巴細(xì)胞融合,形成能分泌高度純一單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞的技術(shù)?梢院唵蔚母爬槿齻(gè)步驟:(1)細(xì)胞的選擇和融合(2)應(yīng)用選擇培養(yǎng)基(HAT)篩選雜交瘤細(xì)胞(3)有限稀釋雜交瘤細(xì)胞克隆化,最終獲得能大量分泌高度純一單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞
過程看似簡單,實(shí)則困難重重,費(fèi)事費(fèi)力費(fèi)感情~辛辛苦苦的幾個(gè)月動(dòng)物免疫可能付諸東流,好不容易檢測(cè)到的陽性克隆可能越來越弱,相信中槍的肯定不止這一些
- 細(xì)胞融合率不高
- 細(xì)胞融合后生長狀態(tài)很差,時(shí)不時(shí)地飄起來,還沒2周細(xì)胞已全軍覆沒
- 單株化實(shí)驗(yàn)不理想,能獲得的細(xì)胞克隆數(shù)量少
- 陽性率低
……
如果你有遇到以上問題,不防試試這款產(chǎn)品——HybriMore雜交瘤促進(jìn)生長劑,盡最大可能保住若干個(gè)月辛苦免疫的成果--來之不易的抗體分泌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):
- 增加雜交瘤細(xì)胞存活率
- 提升單株化雜交瘤細(xì)胞成功率
- 非動(dòng)物性來源成分,雜交瘤細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生依賴性,使用過程可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)酌情減少用量
部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
a. 增加單株化融合瘤細(xì)胞存活率
HbriMore雜交瘤促進(jìn)生長劑可以大幅提升融合后雜交瘤數(shù)目,添加HbriMore培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,平均一盤96孔可以實(shí)現(xiàn)1000-1500個(gè)NS-1融合細(xì)胞存活,相比一般培養(yǎng)液可以增加10倍以上細(xì)胞數(shù)目
b. 提高單株化成功率
使用HbriMore雜交瘤促進(jìn)生長劑進(jìn)行單株化,每一盤約有90-96個(gè)細(xì)胞存活,單株化成功率超過80%,而一般牛血清培養(yǎng)液或Feeder Layer存活率分別為10-40%和50-80%
c. 不會(huì)降低抗體生產(chǎn)量
HbriMore雜交瘤促進(jìn)生長劑不會(huì)對(duì)其分泌抗體量產(chǎn)生影響且HbriMore為非動(dòng)物性來源的純化學(xué)配方,不會(huì)對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)面影響
風(fēng)險(xiǎn)提醒:此款產(chǎn)品并非對(duì)所有客戶的實(shí)驗(yàn)流程均適用,以上數(shù)據(jù)僅供參考,具體的用量和效果需實(shí)際使用過程仔細(xì)觀察和進(jìn)行數(shù)據(jù)對(duì)比。目前使用效果明顯的客戶回購率很高。
最后給大家分享個(gè)小編的經(jīng)歷
關(guān)于雜交瘤的以上問題小編讀書的時(shí)候全部中槍。00年代的實(shí)驗(yàn)室流行克隆新基因,被老板分配了一個(gè)NCBI上同源家族文獻(xiàn)少于3篇的基因,在CRO服務(wù)不發(fā)達(dá)的年代,未在幾家抗體公司貨架上的基因,只能硬著頭皮自行制備抗體。小編志向滿滿地?cái)]起袖子開始純化蛋白,免疫兔子和小鼠,關(guān)鍵的那幾天恨不得搬著行軍床上實(shí)驗(yàn)樓天臺(tái)簡易動(dòng)物房和動(dòng)物們陪吃陪住,小鼠在某學(xué)霸師姐的幫助下成功融合并檢測(cè)到效價(jià)不錯(cuò)的抗體分泌克隆若干個(gè),無奈隨著一輪輪的單克隆化過程,陽性數(shù)目越來越少,抗體表達(dá)量越來越低,以至于后期擴(kuò)增后不敢再進(jìn)行一輪單克隆化而選擇凍存保種。好在兔子免疫效果也不錯(cuò),最后在某學(xué)霸師兄的幫助下成功獲取兔子全血和血清。可喜的是,在折騰半年之后多抗制備成功?蓯赖氖请S后的半年時(shí)間小編花了3個(gè)月驗(yàn)證了合格的可以避開同源基因的的siRNA序列,又花了3個(gè)月在這批siRNA的協(xié)助下驗(yàn)證了多抗的特異性和靈敏度。至于那批未再單克隆化的抗體分泌細(xì)胞,十幾年過去了,還靜靜地躺在液氮罐。。。。。。
小編想說,在CRO服務(wù)越來越普及和專業(yè)化的年代,能夠?qū)⒎呛诵膶?shí)驗(yàn)部分外包出去的小伙伴們,你們真是太幸福了,是不是要多發(fā)一些文章,多做一些好藥出來。
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