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細(xì)胞形態(tài)異常,魚(yú)骨圖來(lái)幫忙(四)

瀏覽次數(shù):2589 發(fā)布日期:2019-10-16  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

DuangDuangDuang~
BI中國(guó)市場(chǎng)部又來(lái)給大家送福利啦
我們的魚(yú)骨圖分析即將接近尾聲啦
大家有沒(méi)有感覺(jué)收獲頗豐?

本期我們將繼續(xù)介紹可能出現(xiàn)問(wèn)題的部分---培養(yǎng)基
如下圖所示:

接下來(lái)我們將從以下幾點(diǎn)進(jìn)行分析:

血清

不同批號(hào)血清內(nèi)的成分和營(yíng)養(yǎng)組成比例會(huì)不同,因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要經(jīng)過(guò)測(cè)試來(lái)找尋合適的血清批次。當(dāng)實(shí)驗(yàn)需要更換血清時(shí),細(xì)胞需要有一段適應(yīng)期。有些批號(hào)適合養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞或間充質(zhì)干細(xì)胞等。

解決方案:

1.建議少量換置,以使用體積1/3,1/2,2/3的方式漸進(jìn)式置換。
2.提高血清比例增加營(yíng)養(yǎng)讓細(xì)胞更快速適應(yīng)。
3.一次采購(gòu)足量血清避免經(jīng)常更換批號(hào)。
4.需注意購(gòu)買(mǎi)血清的真?zhèn),?qǐng)務(wù)必從正規(guī)經(jīng)銷(xiāo)商處購(gòu)買(mǎi)。如遇價(jià)格低廉或不明通路(未經(jīng)冷鏈全程運(yùn)送)都需提高警惕。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

基礎(chǔ)培養(yǎng)基以形態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液態(tài)培養(yǎng)基。
干粉培養(yǎng)基:自行配置時(shí),需要注意是否需另外添加營(yíng)養(yǎng)物或必須物至培養(yǎng)基中(如:碳酸氫鈉)并調(diào)整pH值。
液態(tài)培養(yǎng)基:使用不適合的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞仍可生長(zhǎng)但特性會(huì)改變。培養(yǎng)基中常用的酚紅(pH指示劑)本身有微弱雌激素作用,會(huì)刺激具有雌激素受器的細(xì)胞生長(zhǎng)。
解決方案:
BI提供不同細(xì)胞專(zhuān)用無(wú)血清培養(yǎng)基,各式基礎(chǔ)培養(yǎng)基。(詳情請(qǐng)戳此處

 

添加因子

在臨床及科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)中,常需外加生長(zhǎng)因子活化細(xì)胞或促進(jìn)分化,建議最好選購(gòu)不含動(dòng)物或人衍生物質(zhì)的高活性,高純度重組蛋白,以確保產(chǎn)品活性符合嚴(yán)格規(guī)范。

常見(jiàn)使用的添加因子如:細(xì)胞因子(Cytokine),這是一類(lèi)小分子蛋白質(zhì)或多肽類(lèi),這些因子可以幫助細(xì)胞生長(zhǎng),促進(jìn)細(xì)胞活化,直接參與免疫調(diào)節(jié)作用和其他細(xì)胞因子的形成,也是細(xì)胞與細(xì)胞之間訊息傳遞的重要橋梁。在正常生理狀況下細(xì)胞受到刺激后也會(huì)自然分泌因子,不同種類(lèi)的細(xì)胞因子也會(huì)具有不同的免疫功能,然而過(guò)度的細(xì)胞因子分泌也可能會(huì)引發(fā)炎癥反應(yīng),可直接、間接誘導(dǎo)或抑制細(xì)胞凋亡。

一些動(dòng)物來(lái)源,組分復(fù)雜的添加劑,如動(dòng)物源的基底質(zhì),批間差比全合成或單一組分試劑大,使用時(shí)必須小心注意。

解決方案:
逍鵬生物提供科研及cGMP級(jí)別細(xì)胞因子、小分子化合物等。

光照

避免紫外線(xiàn)照射培養(yǎng)基,以防培養(yǎng)基中的HEPES、核黃素及色氨酸形成過(guò)氧化氫自由基,對(duì)細(xì)胞造成毒害作用。

解決方案:
如需長(zhǎng)時(shí)間觀(guān)察細(xì)胞,如Live cell imaging,可選用CELL Guidance Systems:LiveLightTM光穩(wěn)定培養(yǎng)基系列:
1.MEMO培養(yǎng)基(取代DMEM),Cat No.:M06-100/M06-500
2.NEUMO培養(yǎng)基(取代Neurobasal),Cat No.:M07-100/M07-500
3.SOS補(bǔ)充劑(取代B-27),Cat No.:M09-20/M09-50

谷氨酰胺

不同的細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)基中都需加入一定量的谷氨酰胺,作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。谷氨酰胺缺乏會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不良甚至死亡。谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解,谷氨酰胺的降解會(huì)導(dǎo)致氨的形成,而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入谷氨酰胺,或可直接選用添加長(zhǎng)效型谷氨酰胺的培養(yǎng)基。

解決方案:

1. BI可提供:
 

名稱(chēng) 貨號(hào)

L-Glutamine Solution,  29.2mg/ml in Saline  (200 millimole/liter)

      谷氨酰胺溶液

 03-020-1   

L-Alanyl-L-Glutamine (Stable Glutamine),  200 mM per liter

         谷氨酰胺溶液(長(zhǎng)效型)

03-022-1

2. 提供各式細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑。(點(diǎn)我

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