滴滴滴~BI中國市場部又來送福利啦
分析完內(nèi)源和外源污染狀況
還是沒有找到原因?
那么我們繼續(xù)分析
根據(jù)魚骨圖魚刺大小所代表的問題發(fā)生概率大小,接下來我們來談?wù)剬?shí)驗(yàn)操作過程中,有哪些因素會(huì)影響到我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果呢。
操作過程
操作過程又可細(xì)分為以下幾類:
接下來我們將逐條進(jìn)行分析↘
操作人員
人體皮膚表面平均帶有103~106/cm2的微生物,污染物可能由于操作人員及穿著衣物帶入。進(jìn)出細(xì)胞房需穿著合適的實(shí)驗(yàn)衣及更換專用的拖鞋,盡量降低粉塵、皮屑及附帶之微生物的揚(yáng)起及掉落,以免造成污染。
解決方案:
人體是細(xì)菌最大的攜帶者,進(jìn)出細(xì)胞房應(yīng)該這么做:
1.換專用實(shí)驗(yàn)衣:勤更衣,無菌無塵衣穿過六小時(shí)后,已可在每平方公分中采集到1-6個(gè)微生物。
2.戴口罩:減少講話,因?yàn)榭谒泻?07個(gè)微生物/ml,并且寄居在人體部分的支原體也會(huì)隨之影響實(shí)驗(yàn)環(huán)境,所以應(yīng)戴口罩操作。
3.戴手套:進(jìn)入細(xì)胞房之前,應(yīng)去除身上配戴所有與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的隨身物品,洗手,消毒,戴上手套,再使用75%酒精消毒。
細(xì)胞房出入口
無凈化的室內(nèi)空氣可檢測到浮游菌500~2000顆/cm3。
2015藥典指導(dǎo)原則《9205藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則》中,有規(guī)定不同潔凈等級實(shí)驗(yàn)室的浮游菌和沉降菌數(shù)量要求。
解決方案:
1.按要求細(xì)胞房應(yīng)為封閉、正壓、潔凈房間(1-10萬級潔凈度)。如受限于現(xiàn)況,可考慮醫(yī)療用移動(dòng)式空氣凈化機(jī),以凈化空氣。
2.如擔(dān)心污染物外泄,細(xì)胞房還應(yīng)設(shè)計(jì)為相對負(fù)壓。
3.人員進(jìn)出細(xì)胞房應(yīng)有管制,經(jīng)過培訓(xùn)才能進(jìn)入操作,避免污染別人。
4.細(xì)胞房窗戶不建議打開!打開窗戶,許多細(xì)菌會(huì)乘機(jī)夾雜在空氣中進(jìn)入細(xì)胞房里。
★細(xì)胞房內(nèi)絕對不可穿拖鞋或涼鞋,以避免帶入腳氣霉菌。應(yīng)該穿全包裹式鞋套或?qū)S眯?/span>
生物安全柜
生物安全柜需盡量保持清潔及凈空,非必要性的物品不要放在里面,容易擾亂操作柜內(nèi)氣流。使用前一定要使用消毒殺菌溶液進(jìn)行擦拭[如75%酒精或Pharmacidal(不需擦拭,自然風(fēng)干)],實(shí)驗(yàn)過程中,若出現(xiàn)液體飛濺的情況,應(yīng)當(dāng)馬上用消毒劑擦拭;使用后需要進(jìn)行消毒并且UV處理20分鐘以上。生物安全柜與超凈工作臺的高效濾網(wǎng)(HEPA filter)滋生細(xì)菌后反而容易成為污染源,良好的操作環(huán)境,才能確保細(xì)胞的健康。
解決方案:
1.Biological Industries (BI)可提供:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
支原體、細(xì)菌、真菌污染預(yù)防噴霧劑Pharmacidal | IC-110100 |
顯微鏡置物臺
顯微鏡頻繁地與不同細(xì)胞系接觸,使顯微鏡也成了污染的高發(fā)地;使用顯微鏡觀察細(xì)胞時(shí),放置細(xì)胞培養(yǎng)皿或是培養(yǎng)瓶的載物平臺與桌面,使用前后需要進(jìn)行消毒,并保持干凈,以免造成交叉污染。
解決方案:
Biological Industries (BI)可提供:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
支原體、細(xì)菌、真菌污染預(yù)防噴霧劑Pharmacidal | IC-110100 |
二氧化碳培養(yǎng)箱
培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2、濕度和溫度都需要定期校準(zhǔn),避免對細(xì)胞提供過低或過高的二氧化碳濃度和不當(dāng)?shù)臐穸扰c溫度;培養(yǎng)箱的環(huán)境非常適合微生物生長,所以水盤使用的水需滅菌并加入抑菌劑,且定期清潔擦拭培養(yǎng)箱體腔與不銹鋼架,杜絕微生物滋生。
解決方案:
1.Biological Industries (BI)可提供:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
支原體、細(xì)菌、真菌污染預(yù)防噴霧劑Pharmacidal | IC-110100 |
支原體預(yù)防試劑Aquaguard-1 | 01-867-1 |
2.選購可滅菌的二氧化碳培養(yǎng)箱,定期滅菌消毒。
3.避免將培養(yǎng)箱直接置于地面上,需要使用支架或置于實(shí)驗(yàn)桌上。如果培養(yǎng)箱直接放在地面上,每次打開門時(shí)產(chǎn)生的空氣流動(dòng),會(huì)增加污垢、灰塵和污染物進(jìn)入培養(yǎng)箱的機(jī)率。
4.培養(yǎng)箱的開門時(shí)間能短則短,開門次數(shù)越少越好,減少空氣傳播的污染物流入。
5.應(yīng)避免在培養(yǎng)箱中有震動(dòng)或是周圍有離心設(shè)備,尤其細(xì)胞剛傳代或是復(fù)蘇時(shí),如受到震蕩搖晃會(huì)造成貼壁遲緩,甚至?xí)芯奂蓤F(tuán)的狀況。
水浴鍋
水浴鍋常年潮濕,是細(xì)胞房中較容易滋生細(xì)菌及真菌的設(shè)備,需要定時(shí)清潔;污染源容易在細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)基或無菌試劑回溫的過程中,粘附瓶身水滴并帶入超凈工作臺中。
解決方案:
1.定期消毒更換水,水浴鍋中應(yīng)使用無菌超純水,并加入抑菌劑。
Biological Industries (BI)可提供:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
支原體預(yù)防試劑Aquaguard-2 | 01-916-1E |
2.水浴回溫時(shí),必須確保容器的瓶蓋不與水接觸;因?yàn)槲廴驹纯赡軙?huì)在此時(shí)通過瓶蓋的縫隙順勢留在瓶口。
3.水浴回溫后必須確保容器表面擦干,75%酒精消毒后再放進(jìn)生物安全柜。
4.水浴鍋使用結(jié)束后,要記得將水浴鍋蓋子蓋上,避免空氣灰塵落入。
滅菌鍋
滅菌鍋及相關(guān)設(shè)備,都需要定時(shí)保養(yǎng)與校準(zhǔn)以維持其正常性能,避免滅菌效果不達(dá)標(biāo)。
解決方案:
定期做BD(Bowie Dick)測試,確保壓力、溫度與時(shí)間均符合滅菌要求。
離心機(jī)
離心機(jī)是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)最常使用儀器, 離心機(jī)內(nèi)部的小縫隙也是藏污納垢之處,容易發(fā)生交叉污染的重災(zāi)區(qū),會(huì)發(fā)生污染的重點(diǎn)懷疑對象。
解決方案:
定期清潔離心機(jī)內(nèi)部的轉(zhuǎn)子和腔室。
Biological Industries (BI)可提供:
產(chǎn)品名稱 | 貨號 |
支原體、細(xì)菌、真菌污染預(yù)防噴霧劑Pharmacidal | IC-110100 |
BI 中國市場部
好啦,本期介紹也就到這里啦,還沒看過癮的小伙伴記得每周關(guān)注公眾號動(dòng)態(tài)噢~
關(guān)注微信公眾號
了解更多細(xì)胞培養(yǎng)知識
BI中國市場部:上海逍鵬生物科技有限公司
產(chǎn)品咨詢:021-58785545-8006, 18917190011
技術(shù)支持:400-820-3979
原文鏈接:閱讀原文