從不同的生物或臨床樣本中可以提取的DNA或RNA數(shù)量差異很大。例如，雖然少量的DNA或RNA可以很容易地從過量的組織和細(xì)胞中純化（例如從幾毫克的組織中），但許多液體活檢樣本可能會產(chǎn)生極少量的DNA或RNA。事實(shí)上，每100μL的尿液或血漿等樣品可能產(chǎn)生1-100 ng或更少的DNA或RNA。測得的濃度最常用的技術(shù)是在260 nm（A260）處測定吸光度。然而，即使是新一代的分光光度計(jì)，該方法的檢出限仍高于2-10 ng/μL。其他技術(shù)，例如使用熒光核酸染色劑，已使每μL范圍的ng或sub-ng更低的DNA或RNA定量成為可能。但是，這可能無法完全克服從液體活檢中定量DNA或RNA的困難，因?yàn)轭A(yù)期的DNA或RNA產(chǎn)量可能在每μL范圍內(nèi)較低的pg或sub-pg。

        有時候，qPCR實(shí)驗(yàn)會成為阻礙你課題順利開展的強(qiáng)勢攔路虎！看似簡單的基因表達(dá)量差異驗(yàn)證，當(dāng)遇到低豐富表達(dá)的基因時，也許就舉步維艱。模板獲取困難導(dǎo)致的RNA提取量少或RNA質(zhì)量不佳，即使選用最佳的試劑、篩選出最良好的引物，也有可能qPCR定量得到的內(nèi)參基因CT值在18-20個cycle，而目的基因在31-35個循環(huán)。遇到這種情況，你是怎么解決的呢？

        基因的豐度是指基因在基因組中的絕對拷貝數(shù)�？煞譃楦哓S度，中等豐度和低豐度。低豐度是指目的基因在基因組中的拷貝數(shù)低，可簡單認(rèn)為2ng 總RNA中低于100個拷貝數(shù)的基因。從qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果來講，當(dāng)擴(kuò)增效率為100%，模板加入量在1-10ng范圍內(nèi)，qPCR得到的CT值高于28時即可認(rèn)為低豐度基因。

        如何進(jìn)行低豐度核酸（DNA或RNA）的定量呢？艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商，為您推薦Norgen Biotek品牌的低豐度核酸（DNA和RNA）定量試劑盒。

產(chǎn)品名稱及描述	貨號	規(guī)格	試劑盒實(shí)物圖
Low Abundance DNA Quantification Kit	57200	48次反應(yīng)
Low Abundance RNA Quantification Kit	58900	48次反應(yīng)

低豐度核酸（DNA和RNA）定量試劑盒特點(diǎn)和優(yōu)勢：

1. 定量分析各種濃度的DNA或RNA，包括更低濃度范圍的ng/µL，pg/µL和sub-pg/µL；
2. 與任何Real-Time PCR系統(tǒng)兼容；
3. 通過使用提供的DNA或RNA標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確定量DNA或RNA。

【低豐度DNA定量試劑盒（貨號57200），廠家測試結(jié)果】：

        DNA定量的靈敏度：低豐度DNA定量試劑盒與其他方法相比。上圖代表不同DNA定量方法的動態(tài)范圍。該試劑盒可以定量從pg和sub-pg范圍內(nèi)的低豐度樣品中純化的DNA。

        使用低豐度DNA定量試劑盒在皮克范圍內(nèi)進(jìn)行DNA定量的靈敏度。代表性qPCR基線圖顯示了DNA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋梯度的擴(kuò)增。 可以從低豐度樣品如液體活檢樣品（如血漿或尿液）中定量純化的DNA。使用Norgen的試劑盒可定量至500 fg的DNA。

        【低豐度RNA定量試劑盒（貨號58900），廠家測試結(jié)果】：

        RNA定量的靈敏度：低豐度RNA定量試劑盒（貨號58900）與其他方法相比。上圖代表不同RNA定量方法的動態(tài)范圍。該試劑盒可以定量從pg和sub-pg范圍內(nèi)的低豐度樣品中純化的RNA。 

         使用低豐度RNA定量試劑盒在皮克范圍內(nèi)進(jìn)行RNA定量的靈敏度。代表性qPCR基線圖顯示了RNA標(biāo)準(zhǔn)品稀釋梯度的擴(kuò)增�？梢詮牡拓S度樣品如液體活檢樣本（如血漿或尿液）中定量純化RNA。可以定量低至500 fg的RNA。

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        Norgen Biotek成立于1998年，公司總部位于加拿大，是一家著名全球化生物技術(shù)公司，生產(chǎn)基于專利技術(shù)的核酸和蛋白質(zhì)純化及富集產(chǎn)品用于研究和診斷。Norgen Biotek 在2003年獲得加拿大國家研究委員會頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎，是一家致力于樣品制備并獲得ISO 9001（產(chǎn)品質(zhì)量）、ISO 13485（產(chǎn)品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設(shè)備，包括用于體外診斷領(lǐng)域）和ISO 15189（可用于臨床檢測機(jī)分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)能力）認(rèn)證的生物科技公司。目前該公司的產(chǎn)品多達(dá)700余種，提供一流的樣品制備試劑盒，應(yīng)用于基因組和蛋白組等不同的領(lǐng)域。

        艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等，可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

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