老子說(shuō)：治大國(guó)如烹小鮮。
網(wǎng)友說(shuō)：待細(xì)胞如養(yǎng)熊貓。

細(xì)胞的生命極其脆弱
消化一定程度上是對(duì)它們的一種折磨

所以做好細(xì)胞消化，
善待你的細(xì)胞們
一些細(xì)節(jié)要注意

在使用胰酶（Trypsins）細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差，做流式時(shí)的CD Marker 也可能會(huì)下降。

細(xì)胞消化心得

對(duì)大部分細(xì)胞消化來(lái)說(shuō)，可以在消化到差不多快要脫落的時(shí)候，移除大部分胰酶，然后直接加新鮮的培養(yǎng)基將細(xì)胞吹打下來(lái)，省去離心步驟。殘余的胰酶含量很低，所以不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生任何影響。
對(duì)于難消化的細(xì)胞，如HCT15, LS411和KM12，用不含Ca²⁺，Mg²⁺的PBS洗滌一次后，加入稍微多一點(diǎn)胰酶，置37ºC徹底消化(一般為幾分鐘)至脫落（一晃細(xì)胞就掉下來(lái)），然后再加培養(yǎng)基終止胰酶反應(yīng)、離心 (若是無(wú)血清培養(yǎng)基，需改加胰酶抑制劑)。這么做的道理是，細(xì)胞消化不徹底，勢(shì)必會(huì)增加吹打輔助脫落的次數(shù)，而吹打次數(shù)越多，細(xì)胞活性越差。

正確選擇細(xì)胞消化試劑
BI提供動(dòng)物來(lái)源的傳統(tǒng)胰酶及基因工程生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。

動(dòng)物胰酶普遍用于血清培養(yǎng)，不同的細(xì)胞加入胰酶的成分和濃度不一樣。貼壁不牢和半貼壁細(xì)胞盡量使用濃度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培養(yǎng)箱孵育，這樣易于控制，對(duì)細(xì)胞的傷害也降到最低。對(duì)于難消化的細(xì)胞就需要使用含EDTA的0.25%的胰酶，而不是無(wú)限的延長(zhǎng)消化時(shí)間。

EDTA有什么作用呢？許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。胰酶切割ECM負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca²⁺，抑制Integrin的貼壁活性，所以EDTA的作用更加溫和。
重組胰酶用于無(wú)血清培養(yǎng)。重組胰酶具有與動(dòng)物源性胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)，但是不含任何動(dòng)物源成分，可替代胰蛋白酶使用。
BI生產(chǎn)的重組胰酶Recombinant Trypsin EDTA Solution ，堪稱傳統(tǒng)胰酶的完美替代者。無(wú)雜酶，無(wú)外源性或內(nèi)源性病毒污染，無(wú)PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制劑，較傳統(tǒng)的胰酶使用方便，在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中減少了很多不必要的操作，細(xì)胞培養(yǎng)效果大大提高了。