做細(xì)胞實驗的各位,
有沒有曾經(jīng)哪一天,
當(dāng)您開心把即將養(yǎng)好的細(xì)胞拿出來
準(zhǔn)備做后續(xù)實驗時,
發(fā)現(xiàn)居然細(xì)菌污染了???
(想想都是淚…)
對當(dāng)時的我們來說,
這些細(xì)菌就是罪犯!!!
一群“十惡不赦”的罪犯!!!
然而,
市面上有各種“打擊罪犯”的抗生素武器
能嘗試挽救我們的細(xì)胞,
但我們了解這些武器的作用方式嗎?
接下來就讓BI小課堂
帶您了解這些“抗生素武器”吧!
抗生素
細(xì)菌就像是一群 “能自制毒藥的罪犯”
抗生素就是能“抑制罪犯生長或殺死罪犯的武器”
最早的抗生素-青霉素(Penicillin)是微生物學(xué)家弗萊明于自然界中發(fā)現(xiàn)的一種抗菌物質(zhì);至今,許多專家以合成或半合成的方式發(fā)明了更多種類的抗生素,用來對抗各種不同的細(xì)菌。
抗生素武器可依其“打擊罪犯的方法”(也就是抗菌方法)簡單分成五大類(下圖1):
1抑制微生物細(xì)胞壁合成- 破壞罪犯的防彈衣
阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,導(dǎo)致細(xì)菌在低滲透壓環(huán)境下溶脹破裂死亡,而哺乳動物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁,不易受這類藥物的影響,所以此類抗生素普遍細(xì)胞毒性較小。
β-內(nèi)酰胺類抗生素(Beta-lactam Antibiotic, 含青黴素Penicillin、頭孢菌素Cephalosporin等)大多為此原理。
2破壞細(xì)胞膜功能- 扒掉罪犯的衣服
與細(xì)菌細(xì)胞膜相互作用,增強(qiáng)細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性、打開膜上的離子通道,讓細(xì)菌內(nèi)部有用物質(zhì)漏出菌體或電解質(zhì)平衡失調(diào)而死。
多粘菌素Polymyxin、達(dá)托霉素Daptomycin等為此類抗生素。
3抑制遺傳物質(zhì)的復(fù)制及轉(zhuǎn)錄- 銷毀罪犯的制毒圖紙
阻礙DNA復(fù)制,抑制細(xì)菌分裂繁殖;或阻礙DNA轉(zhuǎn)錄mRNA,使后續(xù)mRNA翻譯蛋白的過程受阻。
喹諾酮類Quinolones、利福平Rifampin等為此類抗生素。
4抑制蛋白質(zhì)合成– 銷毀制毒所需材料
與細(xì)菌核糖體或tRNA相互所用,抑制細(xì)胞存活所需的結(jié)構(gòu)蛋白和酶等蛋白質(zhì)合成進(jìn)而殺死或抑制細(xì)菌生長。
鏈霉素Streptomycin、新霉素Neomycin、慶大霉素Gentamicin、卡那霉素Kanamycin等為此類抗生素。
5影響微生物代謝功能- 截斷罪犯營養(yǎng)能量來源
細(xì)菌生長過程必須利用葉酸做養(yǎng)料,此類藥物阻斷細(xì)菌葉酸合成,進(jìn)一步使細(xì)菌因葉酸不足而死亡。
甲氧芐啶Trimethoprim、磺酰胺Sulfonamides等為此類抗生素。
▲圖1:常見抗生素抗菌方法示意圖。
而這些抗生素武器又可依“控制罪犯的能力”(是否直接殺死細(xì)菌)再分成兩種:
抑菌型(bacteriostatic)抗生素:無法直接殺死微生物,但能控制微生物增長速度,大多為抑制細(xì)胞壁或蛋白質(zhì)合成的抗生素。
殺菌型(bactericidal)抗生素:可直接破壞微生物本身,大多以破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、阻礙遺傳物質(zhì)復(fù)制或影響代謝功能而導(dǎo)致菌體死亡。
純抑菌型抗生素大多用于臨床治療,抑制病患體內(nèi)細(xì)菌的生長速度,等待病患的免疫系統(tǒng)清除已存在的菌體,然而,體外細(xì)胞培養(yǎng)并沒有免疫系統(tǒng)能幫助我們殺死菌體,所以大多使用殺菌型抗生素來嘗試清除細(xì)菌;但多種抗生素在低濃度的狀況下為抑菌型,在高濃度狀況下則有殺菌效果(轉(zhuǎn)為殺菌型,如青黴素),因此實驗中“預(yù)防性使用”或“補(bǔ)救性使用”上會有濃度的調(diào)整,所以各位在使用購入的抗生素前,請詳閱產(chǎn)品說明書噢。
說了這么多!
直接告訴我怎么救我的細(xì)胞啊!
(這里先不討論細(xì)菌污染以外的處里方法)
步驟 1
先確定是細(xì)菌?真菌?還是無法判斷?并趕快把污染的細(xì)胞跟正常的細(xì)胞隔離!
步驟 2
根據(jù)狀況做以下抉擇...
丟棄污染細(xì)胞,并重新復(fù)蘇細(xì)胞(復(fù)蘇過程如果不放心,可搭配合適的抗生素使用做預(yù)防)。
或使用合適的抗生素來挽救細(xì)胞。
(下表1,BI技術(shù)支持特別為您整理的參考表,詳細(xì)如何使用請來電咨詢:4008203979)
▲表1:BI抗生素產(chǎn)品列表。
最后,有個重要的觀念提醒!
抗生素并不是神仙妙藥,若污染狀況嚴(yán)重一般是救不回來的,而且抗生素可能對細(xì)胞有毒性而造成實驗誤差,所以如果不是極其珍貴的細(xì)胞,建議污染后就丟掉重新復(fù)蘇吧!
不僥幸的態(tài)度
及
良好的無菌操作技巧
才是做好細(xì)胞實驗的
重要基礎(chǔ)噢!
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