各位知道細胞實驗中用量最多的試劑是什么嘛?
沒錯~就是 細胞培養(yǎng)基!
但培養(yǎng)基配方百百種,
如果沒有師兄師姐告訴您該用哪一種,
您知道您的細胞要用哪一種嘛?
就讓BI小課堂用
5張表格
來告訴您吧!
天然 VS 合成培養(yǎng)基
在動物細胞體外培養(yǎng)實驗中,可使用天然培養(yǎng)基(Natural medium)或是合成培養(yǎng)基(Synthetic/Artificial medium) (表1)。
● 天然培養(yǎng)基(Natural medium)
源于動物體液或組織分離提取,營養(yǎng)成分豐富且各項條件與體內(nèi)環(huán)境相似,所以培養(yǎng)效果佳,但成分復雜、批間差較大及各國法規(guī)等問題影響,天然培養(yǎng)基已逐漸被合成培養(yǎng)基所取代。
● 合成培養(yǎng)基(Synthetic/Artificial medium)
由高純度化學成分(無機鹽、氨基酸、維生素、含碳物質等)與純化水配制而成,所有成分都可知其確切含量;合成培養(yǎng)基可依實驗目的可分為以下三種。
短時間保存細胞活性
即各類平衡鹽溶液,具有特定的pH和滲透壓;能維持細胞離開生物體后幾小時內(nèi)的活性。
延長細胞存活時間
即基礎培養(yǎng)基,在平衡鹽溶液中添加各種有機化合物和/或血清配方,配合適當?shù)膶嶒灢僮鳁l件,可將細胞培養(yǎng)至多代。
特殊功能
根據(jù)實驗目的(分化、增殖等),將基礎培養(yǎng)基額外添加各類因子的特殊培養(yǎng)基。
市面上合成培養(yǎng)基種類多樣且便利,已成為目前最廣泛使用的標準化商品。
▲ 表1:天然與合成培養(yǎng)基種類整理。
培養(yǎng)基里到底含些什么成分呢?
培養(yǎng)基一般含有氨基酸、無機鹽、維生素、含碳物質和其他營養(yǎng)素,每種成分對于細胞存活、代謝等功能都有不同影響,不同細胞系需要的成分量也不同,使市面上產(chǎn)生各類培養(yǎng)基配方(表2)。
▲ 表2:簡單介紹各種成分的功能。
干粉 VS 液態(tài)培養(yǎng)基
除了購買各類原料自行配置,市面上提供各類形式的培養(yǎng)基產(chǎn)品,可依據(jù)儲存空間或預算需求做選擇(表3)。
▲ 表3:各類形式的培養(yǎng)基比較。
您要怎么選培養(yǎng)基?
培養(yǎng)基的選擇影響著細胞培養(yǎng)實驗的成功與否,不同細胞有不同的特異性生長要求。因此,我們需要通過文獻閱讀及實驗確定細胞最適合的培養(yǎng)基;表4列出常用細胞系的推薦培養(yǎng)基、表5列出原代細胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基產(chǎn)品,讓您做初步參考。(延伸閱讀:基礎培養(yǎng)基介紹-喂養(yǎng)細胞,選好口糧之BI基礎培養(yǎng)基)
▼ 表4:常用細胞系推薦培養(yǎng)基。
以上僅列出少數(shù)常用細胞,建議大家可靈活利用以下幾個網(wǎng)站,輸入您使用的細胞株名稱查找建議使用培養(yǎng)基:
*點擊名稱可直接連接網(wǎng)站*
▼ 表5:原代細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基產(chǎn)品 (Biological Industries)。
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Reference
Arora M. Cell culture media: a review[J]. Mater methods, 2013.
Yang Z, Xiong H R. Culture conditions and types of growth media for mammalian cells[M]//Biomedical Tissue Culture. IntechOpen, 2012.