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無血清快速細胞凍存液操作說明書

瀏覽次數(shù):11074 發(fā)布日期:2018-11-2  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

無血清快速細胞凍存液,通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。

產品特色
1.高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級原料進行生產,不含動物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產品之間有更高的產品質量一致性。
2.細胞存活率高,無批次差異。
3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。

凍存液成分
無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液

保存條件
儲存于4℃以下。質量保障期從產品的生產日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將100 ml產品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

使用方法
細胞冷凍保存方法
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。
1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。
2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。
(參考:5×105至5×106 cells/ml)。
3.取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。
4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。
5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。
6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。
7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。

凍存細胞復蘇方法
1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。
2.待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。
3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4.清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。
5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。
6.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

復蘇細胞存活率

細胞株 凍存時間(月) 細胞存活率(%)
(凍存溫度-80℃)
293 12 97.6
Sp2/0 12 92.0
CHO-S 12 98.2

● 最好用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
● 控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響細胞復蘇效果。
● 重懸細胞的過程中,請務必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復蘇時才不會成團。
● 細胞操作請注意無菌
 

來源:上海一基實業(yè)有限公司二部
聯(lián)系電話:021-60548336
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