雜交瘤技術(shù)仍然是單克隆抗體發(fā)現(xiàn)的主要技術(shù)，尤其是在治療性抗體藥物治療領(lǐng)域，相比噬菌體、酵母等非天然文庫(kù)，具有成藥性好、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。由于雜交瘤獲得的單克隆抗體，系經(jīng)過(guò)哺乳動(dòng)物細(xì)胞自然進(jìn)化篩選獲得的序列，因此其通常不會(huì)遇到表達(dá)困難、產(chǎn)量低、非特異性結(jié)合等問(wèn)題。

雜交瘤技術(shù)具有以下挑戰(zhàn)：
1. 對(duì)于免疫原性低的抗原，抗體滴度低、難以產(chǎn)生中和抗體；
2. 融合效率低、難以獲得低豐度存在的克�。�
3. 抗體親和力低、表位分布局限。

針對(duì)以上局限性，啟文生物提出了以下優(yōu)化方案：

1. 針對(duì)低免疫原性抗原，免疫增強(qiáng)佐劑提高抗體效價(jià)

方法：我們的免疫增強(qiáng)佐劑在CFA等傳統(tǒng)佐劑的基礎(chǔ)上拓展T細(xì)胞的抗原表位識(shí)別，進(jìn)而擴(kuò)展抗體的表位

結(jié)果：多次試驗(yàn)表明，初始免疫后，效價(jià)可提高5~10倍。

2. 針對(duì)融合時(shí)陽(yáng)性率較低的現(xiàn)象，陽(yáng)性克隆佐劑增強(qiáng)B細(xì)胞豐度

方法：在Pre-fusion boost階段，我們的陽(yáng)性克隆佐劑可以增強(qiáng)陽(yáng)性克隆在B細(xì)胞中的豐度，通過(guò)提高陽(yáng)性率，從而幫助融合到稀有的克隆

結(jié)果：多次試驗(yàn)表明，對(duì)于大多數(shù)抗原，改方法可以提高陽(yáng)性率3~5倍。

3.專(zhuān)用培養(yǎng)體系提高融合效率

方法：我們提供經(jīng)馴化的小鼠SP2/0細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)血清。對(duì)于結(jié)合先進(jìn)的電融合技術(shù)來(lái)說(shuō)，我們自產(chǎn)的電融合緩沖液的實(shí)驗(yàn)效果和進(jìn)口產(chǎn)品相當(dāng)。

結(jié)果：根據(jù)客戶(hù)反饋，融合效率最高可達(dá)1 : 1000，通�？梢宰龅�1 : 4000以上。如果結(jié)合融合處理液一起使用，可以進(jìn)一步提高融合效率（融合效率提升3~5倍）。

4.  雜交瘤細(xì)胞增強(qiáng)培養(yǎng)基提高克隆生長(zhǎng)率

方法：在雜交瘤細(xì)胞電融合之后的克隆篩選和生長(zhǎng)階段，我們提供雜交瘤細(xì)胞增強(qiáng)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基含有多種促進(jìn)雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞因子。

結(jié)果：可以提高克隆生長(zhǎng)率近10倍。

對(duì)于聚乙二醇法和電融合法來(lái)說(shuō)，我們的大多數(shù)試劑都是通用的。具體種類(lèi)如下表所示：

相關(guān)試劑圖片：