Human Stem Cell Kit——用于人干細(xì)胞轉(zhuǎn)染
 

　　產(chǎn)品介紹

　　在做干細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要先使用Human Stem Cell Nucleofector® Starter Kit [Cat. No. VPH-5002]以確定最適工作程序和Nucleofector® Solution(Solution1或Solution2)。

　　Human Stem Cell Kit 1和Human Stem Cell Kit 2適用于Nucleofector™ IIs/2b轉(zhuǎn)染儀，這是一種單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀，支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺(tái)，適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和原代細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。 兩個(gè)試劑盒的區(qū)別只是含有的Nucleofector® Solution不同。試劑盒內(nèi)除含有特異的核轉(zhuǎn)染液(Nucleofector™溶液)，另外含有pmaxGFP™對(duì)照載體。

　　Lonza公司有50多種原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　試劑盒組分

　　1. 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液

　　2. 添加劑

　　3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)

　　4 .pmaxGFP™ 陽(yáng)性質(zhì)粒

　　5. 單孔電轉(zhuǎn)杯

　　試劑盒優(yōu)點(diǎn)

　　1)轉(zhuǎn)染效率高達(dá)95%;

　　2)細(xì)胞活力高達(dá)98%;

　　3)需要更少的DNA和細(xì)胞;

　　4)避免了繁瑣的操作

　　已經(jīng)驗(yàn)證過(guò)的細(xì)胞為：H1, H9, H14, HS306

　　延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染

　　“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實(shí)現(xiàn)了貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實(shí)現(xiàn)了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過(guò)程中)的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了第一個(gè)原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;

　　2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。

　　2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染

　　優(yōu)勢(shì)：

　　– 可在神經(jīng)元貼壁生長(zhǎng)的任何階段進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染或多次進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染

　　– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長(zhǎng)的生理狀態(tài)

　　– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達(dá)70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法

　　– 整個(gè)過(guò)程維持了細(xì)胞功能

　　– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析