P3 Primary Cell 4D X Kit L——用于原核細胞轉(zhuǎn)染
 

　　產(chǎn)品介紹

　　Lonza公司目前有5種不同的原代細胞轉(zhuǎn)染液(Nucleofector™ Solutions)可適用于4D-Nucleofector系統(tǒng)，分別為P1, P2, P3, P4和P5。

　　P3 Primary Cell 4D X Kit L適用于4D-Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，該系統(tǒng)采用導(dǎo)電性聚合物，取代了金屬鋁離子，保證高效轉(zhuǎn)染的同時獲得高的細胞存活率。由于哺乳動物神經(jīng)細胞缺乏細胞特異的Amaxa™優(yōu)化操作手冊，可使用P3 Primary Cell Kits配有細胞特異的Protocol，可用來優(yōu)化哺乳動物神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染條件。可用來轉(zhuǎn)染不同哺乳動物的多種神經(jīng)細胞。

　　試劑盒組分(100μl體系，24 Test)

　　- 細胞特異性核轉(zhuǎn)染液(2.25 ml)

　　- 添加劑(0.5 ml)

　　- pmaxGFP陽性質(zhì)粒(50μg)

　　- 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)(24個)

　　Nucleofector 細胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟(詳細Protocol請登錄Lonza官方網(wǎng)站查閱)

　　整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。

　　第1步：處理細胞，精確計數(shù)

　　第2步：混合DNA、轉(zhuǎn)染液，重懸細胞，加入轉(zhuǎn)染杯

　　第3步：將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀，按鍵選擇相應(yīng)程序，按"start"鍵開始轉(zhuǎn)染，10秒鐘左右

　　第4步：取出細胞繼續(xù)培養(yǎng)。

　　延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染

　　“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實現(xiàn)了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實現(xiàn)了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過程中)的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了第一個原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;

　　2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。

　　2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉(zhuǎn)染

　　優(yōu)勢：

　　– 可在神經(jīng)元貼壁生長的任何階段進行原位核轉(zhuǎn)染或多次進行原位核轉(zhuǎn)染

　　– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)

　　– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法

　　– 整個過程維持了細胞功能

　　– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析