Basic Kit for Primary neural cells——用于原代神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染
 

　　產(chǎn)品介紹

　　Basic Kit for Primary neural cells 適用于Nucleofector™ IIs/2b轉(zhuǎn)染儀，這是一種單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀，支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺(tái)，適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和原代細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。

　　Basic Kit for Primary neural cells(原代神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒)可用來(lái)轉(zhuǎn)染原代哺乳動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞、分離自胚胎(E18)或新生(P1-2)哺乳動(dòng)物神經(jīng)組織的原代神經(jīng)細(xì)胞。試劑盒配有專門的操作手冊(cè)，試劑盒內(nèi)除含有特異的核轉(zhuǎn)染液(Nucleofector™溶液)，另外含有pmaxGFP™對(duì)照載體。

　　Lonza公司有50多種原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　試劑盒組分(25 Test)

　　1. 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液(2.25ml)

　　2. 添加劑(0.5ml)

　　3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)(25個(gè))

　　4 .pmaxGFP™ 陽(yáng)性質(zhì)粒(10μg)

　　5. 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)(25個(gè))

　　*所有組分可儲(chǔ)存在4℃，長(zhǎng)期保存時(shí)，陽(yáng)性質(zhì)粒保存在-20℃。

　　Nucleofector 細(xì)胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟(詳細(xì)Protocol請(qǐng)登錄Lonza官方網(wǎng)站查閱)

　　整個(gè)操作過(guò)程只需四步，非常簡(jiǎn)單、高效。

　　第1步：處理細(xì)胞，精確計(jì)數(shù)

　　第2步：混合DNA、轉(zhuǎn)染液，重懸細(xì)胞，加入轉(zhuǎn)染杯

　　第3步：將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀，按鍵選擇相應(yīng)程序，按"start"鍵開(kāi)始轉(zhuǎn)染，10秒鐘左右

　　第4步：取出細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。

　　延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染

　　“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實(shí)現(xiàn)了貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實(shí)現(xiàn)了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過(guò)程中)的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。

　　2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了第一個(gè)原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;

　　2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。

　　2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染

　　優(yōu)勢(shì)：

　　– 可在神經(jīng)元貼壁生長(zhǎng)的任何階段進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染或多次進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染

　　– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長(zhǎng)的生理狀態(tài)

　　– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達(dá)70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法

　　– 整個(gè)過(guò)程維持了細(xì)胞功能

　　– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析