MH培養(yǎng)基如何滅菌最合適以及MH培養(yǎng)基的使用方法
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微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的首字母縮寫(xiě),指的是水解酪蛋白。而MH培養(yǎng)基指的就是水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培養(yǎng)基,可配置成MH血瓊脂培養(yǎng)基用于鏈球菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)。本文主要介紹的是MH培養(yǎng)基如何滅菌最合適以及MH培養(yǎng)基的使用方法。
MH培養(yǎng)基如何滅菌
MH培養(yǎng)基可用濕熱滅菌法,115度30分鐘,作分離馴化蛋白酶的菌。
MH培養(yǎng)基的使用方法:
1、 稱(chēng)取本品38g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用.
2、 試驗(yàn)菌液的制備:從TSA平皿上挑取3-5個(gè)形態(tài)相似的菌落頂端部分接種MHB或TSB培養(yǎng)基.經(jīng)36±1℃培養(yǎng)4-6小時(shí)后,比濁至0.5麥?zhǔn)蠁挝?
3、 接種:用無(wú)菌棉拭浸取比濁好的菌液,在管壁內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)壓除去過(guò)多菌液,然后再輕輕涂抹培養(yǎng)基,每一平皿涂抹三次.每次涂抹后均需將平皿轉(zhuǎn)動(dòng)60度,再行下一次涂抹.每一質(zhì)控菌株涂抹三個(gè)平皿.
4、 貼片:接種后的平皿置室溫片刻,待稍干后,用無(wú)菌鑷子將抗生素紙片均勻貼布于平皿瓊脂表面.各紙片間中心間距不得小于24mm,紙片距平皿邊不得小于15mm.一旦紙片接觸瓊脂表面,即不可再移動(dòng),因此時(shí)藥物已開(kāi)始擴(kuò)散.
5、 培養(yǎng):紙片貼妥后,在15-30分鐘內(nèi),將平皿翻過(guò)來(lái)置于36±1℃培養(yǎng)16—24h后,觀察結(jié)果.平皿培養(yǎng)時(shí)不宜堆放,以二個(gè)相疊為宜.