FISH熒光原位雜交技術(shù)：1969年，Gall和Pardue等首次將同位素探針用于原位雜交實(shí)驗(yàn)，獲得成功。1987年，染色體原位抑制雜交法的創(chuàng)建，使FISH技術(shù)得以迅速發(fā)展。隨后，Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰熒光素等非放射性物質(zhì)標(biāo)記探針，創(chuàng)立了雙色FISH熒光原位雜交技術(shù) 。1990年，Nederlof等用3種熒光素成功探測出了3種以上的靶位DNA序列，從而宣告了多色FISH技術(shù)的問世。

FISH熒光原位雜交技術(shù)是一種非放射性分子遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，其基本原理是將直接與熒光素結(jié)合的寡聚核苷酸探針或采用間接法用生物素、地高辛等標(biāo)記的寡聚核苷酸探針與變性后的染色體、細(xì)胞或組織中的核酸按照堿基互補(bǔ)配對原則進(jìn)行雜交，經(jīng)變性-退火-復(fù)性-洗滌后即可形成靶DNA 與核酸探針的雜交體，直接檢測或通過免疫熒光系統(tǒng)檢測，最后在熒光顯微鏡下顯影，即可對待測DNA進(jìn)行定性、定量或相對定位分析。

【FISH熒光原位雜交基本原理】
熒光原位雜交技術(shù)問世于70年代后期，其曾多用于染色體異常的研究，近年來隨著FISH所應(yīng)用的探針鐘類的不斷增多，特別是全Cosmid探針及染色體原位抑制雜交技術(shù)的出現(xiàn)，使FISH技術(shù)不僅在細(xì)胞遺傳學(xué)方面，而且還廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)研究，如基因診斷基因定位等。

原有的放射性同位素原位雜交技術(shù)存在著較多缺點(diǎn)，諸如每次檢驗(yàn)均 需重新標(biāo)記探針，已標(biāo)記的探針表現(xiàn)出明顯的不穩(wěn)定性，需要較和時間的曝光時間和對環(huán)境的污染等。在觀察結(jié)果時，需要較多的分裂進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。>>>勝創(chuàng)生物。

此外，由于放射性銀粒和染色體聚集的不同平面，可能引起計數(shù)上的誤差等。與之比FISH則具有①操作操作簡便，探針標(biāo)記后穩(wěn)定，一次標(biāo)記后可使用二年②方法敏感，能迅速得到結(jié)果③在同一標(biāo)本上，可同時檢測幾種不同探針④不僅可用于分裂期細(xì)胞染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)變化的研究，而且還可用于間期細(xì)胞的染色體數(shù)量及基因改變的研究等特點(diǎn)。

熒光原位雜交技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是：如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報告分子如生物素、地高辛，可利用該報告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進(jìn)行定性、定量或相對定位分析。

【熒光原位雜交技術(shù)優(yōu)勢】
FISH技術(shù)有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢：① 安全、快速、靈敏度高；② 探針能較長時間保存；③ 多色標(biāo)記，簡單直觀；④ 可用于中期染色體及間期細(xì)胞的分析；⑤ 可應(yīng)用于新鮮、冷凍或石蠟包埋標(biāo)本以及穿刺物和脫落細(xì)胞等多種物質(zhì)的檢測。

【熒光原位雜交技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域】
該技術(shù)不但可用于已知基因或序列的染色體定位，而且也可用于未克隆基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢。FISH應(yīng)用領(lǐng)域包括臨床應(yīng)用 、在細(xì)胞遺傳學(xué)研究的應(yīng)用 、在基因圖譜繪制的應(yīng)用 、用于基因擴(kuò)增的檢測。