細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品振蕩15分鐘的理論依據(jù)介紹

瀏覽次數(shù)：2642　發(fā)布日期：2015-4-24　來源：上海北諾生物科技有限公司

細(xì)菌內(nèi)毒素（Endotoxin），是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有結(jié)構(gòu)，它在細(xì)菌生長、繁殖過程中，并不分泌到介質(zhì)中，也不能從外壁層上自然脫落，它不是細(xì)菌的代謝產(chǎn)物，當(dāng)細(xì)菌死亡解體后，才顯示出一系列的內(nèi)毒素生物活性。

細(xì)菌內(nèi)毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)是脂多糖和微量蛋白的復(fù)合物，脂多糖由三部分組成：O-特異性鏈、核心多糖和類脂A三部分組成。

O-特異性鏈：向外由若干個(gè)低聚糖的重復(fù)單位組成的多糖鏈，具有特異性。

核心多糖：分為內(nèi)核心及外核心，外核心由數(shù)種單糖，包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等組成。內(nèi)核心含有庚糖及特殊的KDO（3-脫氧-D-甘露糖-辛酮糖）。KDO以耐酸的酮糖鍵與類脂A的氨基葡萄糖連接。所有G^-菌都有此結(jié)構(gòu)。

類脂A：位于最外層，是以脂化的葡萄糖胺二糖為單位，通過焦磷酸鍵組成的一種獨(dú)特的糖脂化合物，具有致熱作用，是革蘭氏陰性細(xì)菌內(nèi)毒素的毒性成分。游離的類脂A可自身凝集成高分子的復(fù)合物，其分子量大小不等。游離的類脂A含有疏水性的中心及親水性的邊緣，是一種雙相分子。

內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品是從大腸桿菌E.ColiO₁₁₁B₄菌株的細(xì)胞壁提取精制而成。細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解后，內(nèi)毒素的疏水性中心相互結(jié)合形成大分子復(fù)合體，而難溶于水。《細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法》要求“將細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品或細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解后在旋渦混合器上混勻15分鐘，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混勻30秒鐘。” 在旋渦混合器上混勻15分鐘的目的是借助外力破壞這種分子復(fù)合體，使內(nèi)毒素均勻的分布在水溶液中，保證試驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)準(zhǔn)確。如果沒有旋渦混合器或混勻時(shí)間不夠，均會導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)毒素分子復(fù)合體，這種溶質(zhì)不能分散在溶媒中，而影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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