1. 多肽如何運(yùn)輸和保存?
凍干粉形式的可在常溫下密封運(yùn)輸,但溶解狀態(tài)的多肽不宜長期保存。為了長時間保存多肽,建議以凍干粉形式置于含干燥劑的密封容器內(nèi),可在-20°C(-80°C效果更好)保存數(shù)年,同時避免了細(xì)菌降解和氧化,也可以避免二級結(jié)構(gòu)的形成。
往往容易吸潮,因此建議在稱取時操作迅速,并將剩余多肽密閉儲存在-20°C或更低溫度。與其他多肽相比,含有半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和谷氨酸N -末端的多肽保存期更短。
2. 多肽如何溶解?
的溶解性很大程度上取決于多肽極性。酸性的多肽溶解于堿性溶劑,而堿性多肽可溶解于酸性溶劑,含大量不帶電荷的極性氨基酸殘基或疏水性氨基酸的疏水性多肽和中性多肽可先溶解于少量有機(jī)溶劑中,如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或異丙醇,然后加水(蒸餾水)稀釋。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不能用DMSO溶解,因?yàn)?/SPAN>DMSO可能造成側(cè)鏈氧化。
請盡量以凍干粉形式保存在-20°C(-80°C更佳),但如要保存溶解好的多肽,請注意分裝成小樣存放,以避免反復(fù)凍融。每份樣品融凍后未用完應(yīng)扔掉。細(xì)菌降解有時會成為溶液肽的麻煩,所以請將肽溶于無菌水或直接將多肽肽溶液過濾除菌(0.22 uM)。
3.何謂多肽的純度?
多肽的純度是指HPLC法在214nm波長處檢測到的目標(biāo)多肽的含量(214nm是肽鏈的吸收波長),紫外分光光度計(jì)檢測不到水和殘留的鹽。一般而言,純化后的多肽包含的雜質(zhì)多為序列被修改的多肽,比如:缺失序列(缺失了一個或多個氨基酸殘基的靶序列),截?cái)嘈蛄校用边^程中產(chǎn)生的序列)脫保護(hù)不完全序列(產(chǎn)生于整個合成過程或最后的裂解過程)。