AO-EB雙染試劑盒說(shuō)明書(shū)
AO-EB雙染試劑盒說(shuō)明書(shū)
貨號(hào)：CA1140
規(guī)格：100ml/500ml
保存：4℃避光密封保存，有效期一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
吖啶橙能透過(guò)胞膜完整的細(xì)胞，嵌入細(xì)胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過(guò)胞膜受損的細(xì)胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)為染色增強(qiáng)，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見(jiàn)四種細(xì)胞形態(tài)：活細(xì)胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細(xì)胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細(xì)胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實(shí)驗(yàn)效果。
使用方法：（僅供參考）
使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用現(xiàn)配。
對(duì)于貼壁細(xì)胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞，加入新的PBS；如果需要觀察全部細(xì)胞特性，保留未貼壁細(xì)胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng)：
含酚紅培養(yǎng)基對(duì)觀察有輕微影響。建議使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。
染色液工作濃度和染色時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況適當(dāng)調(diào)整，以期達(dá)到最佳效果。
相關(guān)試劑：
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒
CA1120 Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
C0020 Hoechst 33258染色液（即用型）
C0060 DAPI溶液（1mg/ml）
31800 RPMI Medium 1640培養(yǎng)基
S9000 特級(jí)胎牛血清
貨號(hào)：CA1140
規(guī)格：100ml/500ml
保存：4℃避光密封保存，有效期一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
吖啶橙能透過(guò)胞膜完整的細(xì)胞，嵌入細(xì)胞核DNA，與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過(guò)胞膜受損的細(xì)胞，嵌入核DNA，發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)為染色增強(qiáng)，熒光更為明亮，均勻一致的圓狀或固縮狀、團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見(jiàn)四種細(xì)胞形態(tài)：活細(xì)胞(VN)，核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu)；早期凋亡細(xì)胞(VA)，核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細(xì)胞(NVA)，核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN)，核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩(wěn)定劑不影響實(shí)驗(yàn)效果。
使用方法：（僅供參考）
使用前先根據(jù)用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用現(xiàn)配。
對(duì)于貼壁細(xì)胞或爬片，去掉培養(yǎng)基，用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞，加入新的PBS；如果需要觀察全部細(xì)胞特性，保留未貼壁細(xì)胞，可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng)：
含酚紅培養(yǎng)基對(duì)觀察有輕微影響。建議使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。
染色液工作濃度和染色時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況適當(dāng)調(diào)整，以期達(dá)到最佳效果。
相關(guān)試劑：
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒
CA1120 Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
C0020 Hoechst 33258染色液（即用型）
C0060 DAPI溶液（1mg/ml）
31800 RPMI Medium 1640培養(yǎng)基
S9000 特級(jí)胎牛血清
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