蘆。≧utin)廣泛存在于植物界中,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物至少在70種以上,如煙葉、槐花、蕎麥和蒲公英中均含有。尤以槐花米(為植物Sophorajaponica的未開放的花蕾)和蕎麥中含量最高,可作為大量提取蘆丁的原料。蘆丁是由斛皮素(Quercetin)3位上的羥基與蕓香糖(Rutinose)〔為葡萄糖(Glucose)與鼠李糖(Rhamnose)組成的雙糖〕脫水合成的苷。
蘆丁為淺黃色粉末或極細(xì)的針狀結(jié)晶,含有三分子的結(jié)晶水,熔點(diǎn)為174~178℃,無水物188~190℃。溶解度:冷水中為1:10000;熱水中1:200;冷乙醇1:650;熱乙醇1:60;冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚,溶于堿而呈黃色。
1.
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/DIV>
①通過蘆丁的提取與精制掌握堿-酸法提取黃酮類化合物的原理及操作。
②通過蘆丁結(jié)構(gòu)的檢識(shí),了解苷類結(jié)構(gòu)研究的一般程序和方法。
③了解UV及NMR在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用。
2.要求
①要拿到以下三個(gè)化合物:蘆丁、槲皮素、蘆丁的全乙;衔。
②能夠拿根據(jù)化學(xué)試驗(yàn)及UV、NMR數(shù)據(jù)初步推斷出蘆丁的結(jié)構(gòu)。并對黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)測定有一般性的了解。
試驗(yàn)方法
1.蘆丁的提取與分離(見下圖)
2.蘆丁的鑒定
1)蘆丁的定性反應(yīng)
取蘆丁3~4mg,加乙醇5~6ml使其溶解,分成三份作下述試驗(yàn):
A.取上述溶液1~2ml,加2滴濃鹽酸,在酌加少許鎂粉,注意觀察顏色變化情況。
B.取上述溶液1~2ml,然后滴加2%檸檬酸的甲醇溶液,注意觀察顏色變化情況,在繼續(xù)向試管中加入2%ZrOCl2的甲醇溶液,并詳細(xì)記錄顏色變化情況。
C.取上述溶液1~2ml,然后再加入10%α-等體積的萘酚乙醇溶液,搖勻,沿管壁滴加濃硫酸,注意觀察兩液面產(chǎn)生的顏色變化。
2)蘆丁的紫外光譜解析
取蘆丁溶于色譜純甲醇中,加入規(guī)定的試劑,測定其UV光譜,試解析光譜并初步判斷其結(jié)構(gòu)。
3)蘆丁的NMR波譜解析
A.蘆丁的三甲基硅醚NMR譜的解析
B.十乙;J丁的NMR光譜解析
4)蘆丁水解后糖與苷元的鑒定
A.水解方法:精密稱取蘆丁1g(±0.01g),加1%硫酸100ml,加熱40min,放冷靜置,過濾。所得沉淀用少許水洗除酸,干燥稱重,計(jì)算苷元與糖的重量比。然后用乙醇(95%大約10ml)進(jìn)行重結(jié)晶,即得苷元。
B.苷元的鑒定:用紙色譜法與對照品對照。
本實(shí)驗(yàn)講解要點(diǎn)及注意事項(xiàng)
①蘆丁提取方法,重點(diǎn)介紹堿-酸法的原理及注意事項(xiàng)。
②定性實(shí)驗(yàn)的目的、意義及注意事項(xiàng)。
③UV及NMR光譜在蘆丁結(jié)構(gòu)檢識(shí)中的應(yīng)用。