軍團(tuán)菌抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書
瀏覽次數(shù):1659 發(fā)布日期:2012-9-7
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
軍團(tuán)菌抗體ELISA檢測試劑盒
(美國DRG原裝進(jìn)口:貨號,EIA2814;規(guī)格,96T)
1、適用范圍
作為一種輔助手段用于定性檢測人血清中軍團(tuán)菌總抗,屬于體外診斷試劑。在美國僅用于科研。
2、實驗原理
微孔板中包被著激活的軍團(tuán)菌抗原,實驗過程包含三步
A、待測血清在包被板中的反應(yīng)。血清中特異性抗體可與包被板中的抗 原結(jié)合,洗板除去未結(jié)合樣品。
B、加入酶聯(lián)羊抗人IgA/M/G,酶聯(lián)物可與上步中結(jié)合到包被板的抗體反應(yīng),洗板。
C、底物液顯色反應(yīng),通過顏色變化,可判斷其抗體的含量。
3、試劑組成
名稱 |
規(guī)格 |
微孔條 |
包被軍團(tuán)菌抗原(1-6組) 12 X 8孔 |
酶聯(lián)物 |
1×15ml/瓶標(biāo)記有HRP羊抗人軍團(tuán)菌IgG/M/A抗體白色蓋子 |
陽性質(zhì)控 |
1×0.35ml/瓶 紅色蓋子 |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
1×0.5ml/瓶 藍(lán)色蓋子 |
陰性質(zhì)控 |
1×0.35ml/瓶 綠色蓋子 |
樣品稀釋液 |
1×30ml/瓶 |
底物顯色液 |
1×15ml/瓶含TMB |
濃縮洗滌液(10X) |
1×100ml/瓶 |
終止液 |
1×15ml/瓶1M的硫酸 |
4、試劑儲存保存于2-8℃,稀釋后的洗滌液可在室溫保存一周
5、樣品收集和準(zhǔn)備靜脈穿刺取血,避免交叉感染,禁止使用溶血,污染血液樣品。血液樣品在室溫下不得超過8小時,2-8℃保存不得超過48小時,如需保存更長時間需在-20℃或者更低的溫度下凍存。
6、實驗所需材料儀器但本試劑盒未提供酶標(biāo)儀
微量移液管10ul和200ul
多通道移液器(50-200ul)
去離子水
塑料洗瓶
加樣槍頭
量筒
紙巾
7、實驗步驟(1)、將試劑盒內(nèi)各成份平衡至室溫。
(2)、確定所需的微孔條將其固定在板架上。(1個空白孔,1個陰性質(zhì)控孔,3個標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個陽性質(zhì)控孔)
(3)、按照1:21對樣品,陰性質(zhì)控,標(biāo)準(zhǔn),陽性質(zhì)控進(jìn)行稀釋(10ml血清+200ml的樣品稀釋液)
(4)、加入100ul樣品稀釋液于A1孔作為空白孔,每孔分別加入100ul稀釋后
的質(zhì)控,標(biāo)準(zhǔn)及樣品。
(6)、室溫(20-25℃)反應(yīng)25±5分鐘
(7)、洗板5次
(8)、每孔加入100ul的酶聯(lián)物
(9)、室溫(20-25℃)反應(yīng)25±5分鐘
(10)、洗板5次
(11)、每孔加入100ul的底物液
(12)、室溫下反應(yīng)10-15分鐘
(13)、每孔加入50ul終止液
(14)、30分鐘內(nèi)酶標(biāo)儀讀數(shù)
觀察結(jié)果,或者在450nm/620-650nm處讀數(shù)
注意:洗滌時要反復(fù)洗滌五次8、結(jié)果說明CUTOFF OD值=參比品OD x 相關(guān)因子(CF)
CF值在每個試劑盒上注明。
陰性樣品:樣本OD/CUTOFF OD ≤ 0.90
灰色區(qū)域:0.91<樣本OD/CUTOFF OD<1.09
陽性樣品:樣本OD/CUTOFF OD≥ 1.10
本譯文僅供參考,詳情請以原文為準(zhǔn)。