磷酸鹽緩沖液,Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液,也是PeproTech重組細(xì)胞因子和蛋白溶解所需的常用緩沖液。然而,這些緩沖液的配制比較麻煩,尤其當(dāng)要獲得特定pH值的緩沖液時(shí),調(diào)節(jié)pH值是費(fèi)力、費(fèi)時(shí)的事情。對(duì)于Tris等緩沖液等,pH計(jì)是無法準(zhǔn)確測(cè)量其pH值的。
那么,有沒有簡(jiǎn)便的方法來配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢?
美國(guó)PeproTech公司為此精心設(shè)計(jì)開發(fā)出一個(gè)網(wǎng)上實(shí)用工具--http://www.peprotech-asia.com/convertor/ch/phosphate.html。只要將你所需配置的濃度,pH值,以及配制的體積在網(wǎng)站上相應(yīng)的位置輸入或選定,即可計(jì)算出配制該溶液所需各組分的重量或體積,然后稱取相應(yīng)重量或體積的組分即可配制出您所需的緩沖液。
該網(wǎng)上工具包括以下內(nèi)容:
1) 配制磷酸鹽緩沖液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2) 配制檸檬酸(鹽)緩沖液
由Citric Acid(檸檬酸)和Trisodium Citrate(檸檬酸鈉)混合而得。
3) 配制醋酸溶液
在水中加入一定體積的醋酸而得。
4) 配制Tris緩沖液
由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris堿)混合而得。
5) 重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具
已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù),以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反,也可由一個(gè)蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù),以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。
附:這些緩沖液在溶解PeproTech公司重組細(xì)胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例
1) 磷酸鹽緩沖液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。
2) 檸檬酸(鹽)緩沖液
5mM檸檬酸鈉(pH 8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸(pH 3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3) 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4) Tris緩沖液
5mM Tris(pH 7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH 8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。
關(guān)于PeproTech公司重組細(xì)胞因子和蛋白溶解的具體方法和注意事項(xiàng)請(qǐng)見:
PeproTech公司簡(jiǎn)介:
PeproTech Inc. 創(chuàng)立于1988年,始終致力于為生命科學(xué)研究開發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品,如今已成為能提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白,相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體,以及ELISA試劑盒的世界領(lǐng)導(dǎo)者。PeproTech Inc.的產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、腫瘤壞死因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。
為跟蹤當(dāng)今科研發(fā)展、滿足日益增長(zhǎng)的需求,PeproTech Inc.研制出無動(dòng)物成分的重組蛋白(animal-free recombinant proteins)。這些蛋白是利用專有的無動(dòng)物成分生產(chǎn)設(shè)施,在嚴(yán)格的無動(dòng)物成分條件下生產(chǎn)出來,因此痕量的動(dòng)物源性污染引發(fā)潛在問題的可能性被降至最低,從而完全達(dá)到臨床前研究和細(xì)胞治療用標(biāo)準(zhǔn)。此外,PeproTech Inc.最新還開發(fā)出無動(dòng)物成分的培養(yǎng)基添加物試劑盒(animal-free Media Supplement Kits)。這些試劑盒經(jīng)改良設(shè)計(jì),其中的無血清組分對(duì)多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)有更好的維持能力。
PeproTech Inc.的產(chǎn)品自2000年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)以來,以其優(yōu)良的品質(zhì)和合理的價(jià)格迅速得到國(guó)內(nèi)各重點(diǎn)研究和實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)的認(rèn)可和青睞。鑒于中國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的良好態(tài)勢(shì)和中國(guó)生物醫(yī)藥研發(fā)投入的巨額增長(zhǎng),PeproTech Inc.于2009年10月在中國(guó)蘇州設(shè)立代表機(jī)構(gòu),意為中國(guó)的廣大用戶提供更好的支持和服務(wù),并助中國(guó)的科研和產(chǎn)業(yè)開發(fā)一臂之力。
PeproTech China (派普泰克中國(guó)代表處) 是由美國(guó)PeproTech Inc.亞洲分公司在中國(guó)設(shè)立的外資常駐代表機(jī)構(gòu),負(fù)責(zé)對(duì)細(xì)胞因子及相關(guān)產(chǎn)品(包括抗體和ELISA試劑盒等)進(jìn)行技術(shù)支持和市場(chǎng)推廣。