動物細(xì)胞基因組DNA 快速提取試劑盒(50T)--說明書
瀏覽次數(shù):3053 發(fā)布日期:2011-10-11
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動物細(xì)胞基因組DNA 快速提取試劑盒(50T)
概述:
本方法用于動物細(xì)胞基因DNA 的快速提取,可提取107-108 動物細(xì)胞,其質(zhì)量能夠滿足
各種分子生物學(xué)要求。
組成:
1.溶液A 1ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2.溶液B 20ml
3.溶液C 65ml
4.溶液D 1.5ml Resin,用時充分混勻
5. 溶液E 24ml 洗液(用前加入36ml 無水酒精,充分混勻)
6.溶液F 6ml TE buffer
步驟:
1. ≤107細(xì)胞懸浮于300μl,溶液B 中,反復(fù)混勻,室溫放置5min。
2. 加入800μl 溶液C,20μl 溶液A,25ul 溶液D,充分混勻,室溫放置10~20min。
3. ≥8000rpm 離心5min,棄上清。
4. 加入400μl 溶液C,混勻,≥8000rpm 離心1min,棄上清。
5. 加入500μl 溶液E,混勻,≥8000rpm 離心30~60s,棄上清。
6. 重復(fù)步驟5。
7. ≥12000rpm,離心1min,吸干上清,室溫晾干約5~10min。
8. 加入50ul-100μl 溶液F,混勻。40~50℃保溫1~5min。
9. ≥12000rpm 離心30~60 秒,取上清,即為DNA。
注:
1.細(xì)胞若多,可適當(dāng)加大溶液A 和溶液C 的用量,其它成份不變。
2.混勻一定要溫和,否則DNA 大分子將被打斷,而部分降解。