不同質量的內切酶，實驗結果大不相同！
瀏覽次數(shù)：3741 發(fā)布日期：2009-4-21
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不好的內切酶常常被各種蛋白酶、非特異外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的內切酶切割DNA，則會在切割底物的同時破壞產物的末端（外切酶偷偷切掉1、2個bp，瓊脂糖電泳卻看不出來），讓后續(xù)的連接、克隆和表達出現(xiàn)問題！
而NEB提供的內切酶大部分都經過重組改造，在最大程度上避免了外切酶污染的問題，讓你的基因安全可靠！
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好的內切酶 |
不好的內切酶 |
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· 活性高
· 品質穩(wěn)定，保存期長
· 無其它核酸酶污染（包括外切酶污染） |
·活性不高
·保存一段時間后活性迅速下降
·有其它核酸酶的污染（包括外切酶污染） |
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質粒DNA |
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酶切反應  |
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好的內切酶切割 |
不好的內切酶切割 |
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完整的DNA片段
連接 |
完整的DNA片段
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少量的外切酶損壞DNA末端  不完整的DNA片段+1、2個dNTP |
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成功連接，克隆并表達 |
連接失敗，克隆不成功，無法表達或產物不正確 |
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NEB EcoRV: Survival rate=49/50 |
Company T EcoRV: Survival rate=3/50 |
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看看，不同質量的內切酶，實驗結果大不相同！
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