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文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)——cDNA文庫(kù)構(gòu)建
采用Clontech公司SMART技術(shù),高效構(gòu)建普通cDNA文庫(kù)
服務(wù)類別:測(cè)序/合成總訪問(wèn):3839
最后更新:2015-7-14半年訪問(wèn):82
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文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)——cDNA文庫(kù)構(gòu)建

詳細(xì)描述:
. SMART cDNA 文庫(kù)構(gòu)建 
        以總RNA為模板,采用SMART方法將mRNA在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)質(zhì)粒載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA,并能繁殖擴(kuò)增,這種包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆群體稱為某組織或細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。美吉生物具有眾多的SMART cDNA文庫(kù)構(gòu)建成功案例,可以構(gòu)建不同材料來(lái)源的cDNA文庫(kù)。
 
文庫(kù)特點(diǎn) 
1. 材料用量少:只需1 μg總RNA。
2. 全長(zhǎng)比率高:采用Clontech SMART專利技術(shù),全長(zhǎng)比率一般在30%以上。
3. 實(shí)驗(yàn)周期短:最快2~3周即可完成整個(gè)文庫(kù)構(gòu)建。
 
提供結(jié)果 
1. 產(chǎn)物電泳圖譜
2. 文庫(kù)連接液,保存于-20℃
3. 文庫(kù)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù),包括庫(kù)容量,插入片段平均長(zhǎng)度,重組效率,cDNA完整性評(píng)價(jià)等
4. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
 
應(yīng)用領(lǐng)域 
1. 物種種質(zhì)資源開發(fā)與保護(hù)
2. 物種遺傳功能分析
3. 基因克隆與表達(dá)
4. 新基因的發(fā)現(xiàn)
5. 功能基因的篩選
 
. 抑制性消減雜交 cDNA 文庫(kù)技術(shù)( SSH  
        抑制性消減雜交文庫(kù)技術(shù)結(jié)合了抑制消減雜交、基因文庫(kù)和斑點(diǎn)雜交等多種技術(shù),能高效篩選出差異表達(dá)基因。與傳統(tǒng)的DD-PCR、SAGE及cDNA-RDA等技術(shù)相比,具有低豐度mRNA富集率高、假陽(yáng)性低、靈敏度高、重復(fù)性好等特點(diǎn)。該技術(shù)尤其適用于Genome尚不完全清晰的物種及某些特殊生物材料的研究。

服務(wù)項(xiàng)目 
1. Clontech SSH文庫(kù)(差異基因片段文庫(kù))
2. cDNA消減文庫(kù)(差異基因cDNA文庫(kù))
3. SMART cDNA消減文庫(kù)(差異基因全長(zhǎng)cDNA文庫(kù))

技術(shù)特點(diǎn) 
1. 只需要0.5~2 μg的mRNA或最低只需50ng的總RNA。
2. 可以在物種遺傳信息未知的情況下,進(jìn)行多樣本差異基因高通量篩選,尤其適用于非模式生物(植物\昆蟲\魚類等)的研究。具有通量差異的基因以克隆形式得以保存,便于后續(xù)研究(測(cè)序、RACE、引物設(shè)計(jì)等)。

提供結(jié)果 
1. SSH差減文庫(kù)(PCR產(chǎn)物)
2. 逆向斑點(diǎn)雜交篩選到的差異表達(dá)基因的實(shí)物克隆及序列信息(如合作伙伴要求測(cè)序)
3. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告:構(gòu)建過(guò)程說(shuō)明、圖片、質(zhì)控信息

. 均一化 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建 
        構(gòu)建均一化cDNA文庫(kù),使文庫(kù)中各表達(dá)基因所對(duì)應(yīng)的cDNA拷貝數(shù)相等或接近,能有效克服基因轉(zhuǎn)錄水平上的巨大差異給文庫(kù)篩選和分析帶來(lái)的障礙,有利于研究基因的表達(dá)和序列分析。通過(guò)構(gòu)建均一化文庫(kù),以獲得更全面的基因信息,可以節(jié)省大量的測(cè)序費(fèi)用,性價(jià)比高。美吉生物采用先進(jìn)的cDNA文庫(kù)均一化技術(shù),能減少高豐度表達(dá)基因10~100倍,有效富集低豐度表達(dá)基因,從而大大降低了數(shù)據(jù)冗余率。

文庫(kù)特點(diǎn) 
1. 材料用量少,文庫(kù)構(gòu)建只需1μg總RNA。
2. 技術(shù)成熟,均一化程度高,無(wú)需反復(fù)雜交過(guò)程。
3. 均一化過(guò)程對(duì)插入片段大小無(wú)明顯影響。
4. 均一化后,減低高豐度表達(dá)基因10~100倍。

提供結(jié)果 
1. 文庫(kù)連接液,保存在-20℃
2. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告:文庫(kù)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)(庫(kù)容量,插入片段平均長(zhǎng)度,重組效率,cDNA完整性評(píng)價(jià), 冗余度評(píng)價(jià))、實(shí)驗(yàn)流程、產(chǎn)物電泳圖譜及均一化前后管家基因?qū)Ρ葓D
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