文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)——cDNA文庫(kù)構(gòu)建
詳細(xì)描述:
一. SMART cDNA 文庫(kù)構(gòu)建
以總RNA為模板,采用SMART方法將mRNA在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)質(zhì)粒載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA,并能繁殖擴(kuò)增,這種包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆群體稱為某組織或細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。美吉生物具有眾多的SMART cDNA文庫(kù)構(gòu)建成功案例,可以構(gòu)建不同材料來(lái)源的cDNA文庫(kù)。
文庫(kù)特點(diǎn)
1. 材料用量少:只需1 μg總RNA。
2. 全長(zhǎng)比率高:采用Clontech SMART專利技術(shù),全長(zhǎng)比率一般在30%以上。
3. 實(shí)驗(yàn)周期短:最快2~3周即可完成整個(gè)文庫(kù)構(gòu)建。
提供結(jié)果
1. 產(chǎn)物電泳圖譜
2. 文庫(kù)連接液,保存于-20℃
3. 文庫(kù)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù),包括庫(kù)容量,插入片段平均長(zhǎng)度,重組效率,cDNA完整性評(píng)價(jià)等
4. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
應(yīng)用領(lǐng)域
1. 物種種質(zhì)資源開發(fā)與保護(hù)
2. 物種遺傳功能分析
3. 基因克隆與表達(dá)
4. 新基因的發(fā)現(xiàn)
5. 功能基因的篩選
二. 抑制性消減雜交 cDNA 文庫(kù)技術(shù)( SSH )
抑制性消減雜交文庫(kù)技術(shù)結(jié)合了抑制消減雜交、基因文庫(kù)和斑點(diǎn)雜交等多種技術(shù),能高效篩選出差異表達(dá)基因。與傳統(tǒng)的DD-PCR、SAGE及cDNA-RDA等技術(shù)相比,具有低豐度mRNA富集率高、假陽(yáng)性低、靈敏度高、重復(fù)性好等特點(diǎn)。該技術(shù)尤其適用于Genome尚不完全清晰的物種及某些特殊生物材料的研究。
服務(wù)項(xiàng)目
1. Clontech SSH文庫(kù)(差異基因片段文庫(kù))
2. cDNA消減文庫(kù)(差異基因cDNA文庫(kù))
3. SMART cDNA消減文庫(kù)(差異基因全長(zhǎng)cDNA文庫(kù))
技術(shù)特點(diǎn)
1. 只需要0.5~2 μg的mRNA或最低只需50ng的總RNA。
2. 可以在物種遺傳信息未知的情況下,進(jìn)行多樣本差異基因高通量篩選,尤其適用于非模式生物(植物\昆蟲\魚類等)的研究。具有通量差異的基因以克隆形式得以保存,便于后續(xù)研究(測(cè)序、RACE、引物設(shè)計(jì)等)。
提供結(jié)果
1. SSH差減文庫(kù)(PCR產(chǎn)物)
2. 逆向斑點(diǎn)雜交篩選到的差異表達(dá)基因的實(shí)物克隆及序列信息(如合作伙伴要求測(cè)序)
3. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告:構(gòu)建過(guò)程說(shuō)明、圖片、質(zhì)控信息
三. 均一化 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建
構(gòu)建均一化cDNA文庫(kù),使文庫(kù)中各表達(dá)基因所對(duì)應(yīng)的cDNA拷貝數(shù)相等或接近,能有效克服基因轉(zhuǎn)錄水平上的巨大差異給文庫(kù)篩選和分析帶來(lái)的障礙,有利于研究基因的表達(dá)和序列分析。通過(guò)構(gòu)建均一化文庫(kù),以獲得更全面的基因信息,可以節(jié)省大量的測(cè)序費(fèi)用,性價(jià)比高。美吉生物采用先進(jìn)的cDNA文庫(kù)均一化技術(shù),能減少高豐度表達(dá)基因10~100倍,有效富集低豐度表達(dá)基因,從而大大降低了數(shù)據(jù)冗余率。
文庫(kù)特點(diǎn)
1. 材料用量少,文庫(kù)構(gòu)建只需1μg總RNA。
2. 技術(shù)成熟,均一化程度高,無(wú)需反復(fù)雜交過(guò)程。
3. 均一化過(guò)程對(duì)插入片段大小無(wú)明顯影響。
4. 均一化后,減低高豐度表達(dá)基因10~100倍。
提供結(jié)果
1. 文庫(kù)連接液,保存在-20℃
2. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告:文庫(kù)評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)(庫(kù)容量,插入片段平均長(zhǎng)度,重組效率,cDNA完整性評(píng)價(jià), 冗余度評(píng)價(jià))、實(shí)驗(yàn)流程、產(chǎn)物電泳圖譜及均一化前后管家基因?qū)Ρ葓D
bio-equip.com
上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司專注于新一代DNA高通量測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用和推廣、生物信息分析、臨床診斷試劑盒研發(fā)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究,是上海張江高科技園區(qū)、張江藥谷重點(diǎn)支持企業(yè),華東師范大學(xué)戰(zhàn)略合作單位。目前,美吉生物在上海、北京、廣州三個(gè)一線城市建立了實(shí)驗(yàn)基地,銷售網(wǎng)絡(luò)遍布全國(guó)各地。
美吉生物擁有世界一流的測(cè)序平臺(tái),在ABI3730xl常規(guī)測(cè)序平臺(tái)的基礎(chǔ)上,先后引進(jìn)了羅氏454高通量測(cè)序平臺(tái)和Illumina高通量測(cè)序平臺(tái),專業(yè)提供動(dòng)植物基因組測(cè)序、微生物基因組測(cè)序、宏基因組測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、小RNA測(cè)序、基因表達(dá)譜分析等技術(shù)服務(wù)。
美吉生物擁有一支實(shí)力雄厚的技術(shù)團(tuán)隊(duì),有從事分子生物學(xué)研究十多年、經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)骨干,也有創(chuàng)新進(jìn)取、拼勁十足的希望之星。技術(shù)團(tuán)隊(duì)經(jīng)驗(yàn)豐富,曾參與水稻、番茄、家蠶等多項(xiàng)大型基因組學(xué)項(xiàng)目,可以為您提供專業(yè)、合理、高性價(jià)比的實(shí)驗(yàn)方案。
生物信息學(xué)是國(guó)際前沿的新興學(xué)科,近年來(lái)發(fā)展迅猛。美吉生物擁有一支具有國(guó)際一流水平的生物信息分析團(tuán)隊(duì),不僅可以提供標(biāo)準(zhǔn)流程化的生物信息分析,還可以根據(jù)不同的課題需求,提供個(gè)性化的深度數(shù)據(jù)挖掘。
B2B(Bench to Bedside)的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)模式,大大縮短了醫(yī)學(xué)科學(xué)從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用的時(shí)間,加速了人類進(jìn)入基因組醫(yī)學(xué)時(shí)代的步伐;趯(duì)未來(lái)醫(yī)學(xué)發(fā)展趨勢(shì)的充分理解,美吉生物和國(guó)內(nèi)多家著名三甲醫(yī)院聯(lián)合建立了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心,開展轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究,以迎接基因組醫(yī)學(xué)時(shí)代的到來(lái)。
美吉生物秉承“專業(yè)、卓越”的企業(yè)理念,“以客戶為本,讓客戶滿意”的服務(wù)宗旨,一如既往地致力于提供高品質(zhì)、高效率的技術(shù)服務(wù),努力將公司打造成為國(guó)內(nèi)一流企業(yè)。因?yàn)榫礃I(yè),所以專業(yè);因?yàn)閷I(yè),所以選擇;選擇美吉,選擇滿意!