在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下,DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,這常見于基因的5''-CG-3''序列
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BSP甲基化檢測
一.DNA甲基化簡介
在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下,DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,這常見于基因的5'-CG-3'序列。DNA甲基化導(dǎo)致某些區(qū)域DNA構(gòu)象發(fā)生變化,從而影響了蛋白質(zhì)與DNA的相互作用,且達(dá)到一定程度時將導(dǎo)致基因失活。
亞硫酸氫鹽處理后測序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是檢測基因甲基化的經(jīng)典方法,其原理為:用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA,所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶則不變。
二.服務(wù)要求
1、提供的樣品
提供細(xì)胞(≥106 個)、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等樣品材料,基因組DNA(體積≥50μl,濃度≥50 ng/μl)。
2、提供詳細(xì)的樣本信息
三.訂購信息
服務(wù)名稱 |
服務(wù)內(nèi)容 |
周期 |
報價 |
DNA提取 |
新鮮組織、血液、細(xì)胞 |
1周 |
詢價 |
引物設(shè)計 |
設(shè)計、合成 |
1周 |
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BSP克隆測序法 |
甲基化修飾、PCR擴(kuò)增、克隆、測序 |
3-4周 |
四.報告內(nèi)容
實驗方法,步驟,所用試劑,儀器,引物序列、電泳圖片、測序峰圖、陽性克隆質(zhì)粒;保留剩余引物和模板。